湖南結(jié)果客觀的HE染色檢測

HE染色常見問題：Q5：細(xì)胞核呈棕紅色改變答：蘇木素染液過度氧化；或蘇木素染色后反藍(lán)不足導(dǎo)致。應(yīng)該立即更換蘇木素染色液?；蛟诹鲃幼詠硭?一般自來水PH7.5-7.8)，或在稀釋的氨水溶液，或在0.2%碳酸氫鈉中適當(dāng)浸泡，這些步驟均可一定程度地加強(qiáng)蘇木素染色后的反藍(lán)效果。Q6：伊紅染色較淡答：伊紅的PH改變了(PH可能已大于5)；或反藍(lán)液體未漂洗干凈，殘留后影響胞漿嗜酸性染色；或者切片太薄并且在隨后的脫水步驟停留過久。對策：檢查伊紅染色液PH，可采用乙酸調(diào)至4.6-5.0。根據(jù)以上提示，調(diào)整實(shí)驗(yàn)步驟。冰凍組織切片的HE染色。湖南結(jié)果客觀的HE染色檢測

HE染色實(shí)驗(yàn)步驟：（1）樣品制備：對于貼壁生長細(xì)胞，胰酶消化，調(diào)整細(xì)胞濃度約1×105/ml，滴加于蓋玻片上(置于6孔板中)，培養(yǎng)相應(yīng)時(shí)間后，取出細(xì)胞爬片，用PBS洗滌3次。（2）樣品固定：95%乙醇固定20min，PBS洗滌2次，每次1min。（3）染核：蘇木素染液染色2-3min，自來水洗滌。（4）分色：鏡下觀察，若細(xì)胞核染色過深，用1%鹽酸酒精溶液分色數(shù)秒，自來水洗滌。（5）染胞質(zhì)：浸入伊紅染液染色1min，自來水洗滌。（6）吹干或自然晾干細(xì)胞爬片后，中性樹膠封片。若細(xì)胞用4%多聚甲醛固定，則染色時(shí)間相應(yīng)延長，蘇木素染色12-15min，伊紅5min即可重慶比較好的HE染色公司海馬組織HE染色如何觀察。

HE染色細(xì)胞核灰藍(lán)原因：（1）組織處理溫度過高、過熱，在石蠟停留的時(shí)間過長；（2）固定時(shí)間太短，接下來就直接在高濃度的乙醇中行脫水處理。對策：理論上來說，加熱處理*在組織浸蠟步驟才使用，組織不能在熱的蠟液中停留過長時(shí)間。如果由于某些原因不能進(jìn)行下步包埋處理，完成浸蠟處理后的組織，可將組織連同塑料包埋盒一并放置在室溫空氣中，冷卻凝固，以備包埋。待需要包埋時(shí)再重新加溫直至石蠟融化即可。組織在處理前必須確保固定良好，脫水比較好能從低濃度的乙醇開始。

HE染色結(jié)果判讀：細(xì)胞核被蘇木精染成鮮明的藍(lán)色，軟骨基質(zhì)、鈣鹽顆粒呈深藍(lán)色，粘液呈灰藍(lán)色。細(xì)胞漿被伊紅染成深淺不同的粉紅色至桃紅色，胞漿內(nèi)嗜酸性顆粒呈反光強(qiáng)的鮮紅色。膠原纖維呈淡粉紅色，彈力纖維呈亮粉紅色，紅血球呈橘紅色，蛋白性液體呈粉紅色。著色狀況與組織或細(xì)胞的種類有關(guān)，也隨其生活周期及病理變化而改變。例如，細(xì)胞在新生時(shí)期胞漿對伊紅著色較淡或輕度嗜堿，當(dāng)其衰老時(shí)或發(fā)生退行性變則呈現(xiàn)嗜伊紅濃染。膠原纖維在老化和出現(xiàn)透明變性時(shí)，伊紅著色由淺變深。H-E染色評定標(biāo)準(zhǔn)：（1）切片完整，厚度4-6微米，厚薄均勻，無皺褶無刀痕；（2）染色核漿分明，紅藍(lán)適度，透明潔凈，封裱美觀。HE染色切片知識以及如何做出漂亮的切片。

HE染色法的話，不能準(zhǔn)確說出細(xì)胞器的顏色，實(shí)驗(yàn)記錄或考試時(shí)只能說染色效果為 :細(xì)胞核藍(lán)色，胞質(zhì)、肌纖維、膠原纖維和紅細(xì)胞呈深淺不一的紅色?；蛘咴敿?xì)說明如下:細(xì)胞核被蘇木精染成鮮明的藍(lán)色，軟骨基質(zhì)、鈣鹽顆粒呈深藍(lán)色，粘液呈灰藍(lán)色。細(xì)胞漿被伊紅染成深淺不同的粉紅色至桃紅色，胞漿內(nèi)嗜酸性顆粒呈反光強(qiáng)的鮮紅色。膠原纖維呈淡粉紅色，彈力纖維呈亮粉紅色，紅血球呈橘紅色，蛋白性液體呈粉紅色。蘇木精染液為堿性 ,主要使細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核糖體著紫藍(lán)色 ；伊紅為酸性染料 ,主要使細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)中的成分著紅色。比較常見的病理染色HE染色？湖南結(jié)果客觀的HE染色檢測

HE染色試驗(yàn)技術(shù)及注意事項(xiàng)。湖南結(jié)果客觀的HE染色檢測

HE染色不管怎么操作，始終無法染色或淡染答：這種情況一般因?yàn)榻M織固定時(shí)采用了酸性甲醛;或者組織在甲醛中浸泡時(shí)間太長;或者久置的甲醛變性分解為甲酸。補(bǔ)救：防患于未然，要么使用新鮮的中性甲醛固定，要么在存放的甲醛中加一點(diǎn)碳酸鈉中和甲酸。對于已經(jīng)固定的組織可考慮再次固定；對于已經(jīng)制出的片子，染色前采用5%重鉻酸鉀溶液浸泡半小時(shí)以上，然后自來水漂洗5min，可改善染色。也可以將切片放入3%硫酸鐵銨溶液中，補(bǔ)充染色媒介，增強(qiáng)蘇木素與組織的親和力(蘇木素染色必須要媒介才能染上，單純的蘇木素與組織的親和力很弱)。湖南結(jié)果客觀的HE染色檢測