接觸生物標(biāo)志物

來源: 發(fā)布時(shí)間:2022-04-22

多重?zé)晒饷庖呓M化,主要的技術(shù)原理來自TSA技術(shù),TSA即酪酰胺信號(hào)放大技術(shù)(Tyramide signal amplification),是一類利用辣根過氧化酶(HRP)對(duì)靶蛋白或核酸進(jìn)行高密度原位標(biāo)記的酶學(xué)檢測方法。該技術(shù)可與高性能染料Alexa Fluor、傳統(tǒng)熒光染料和比色檢測系統(tǒng)相兼容。 簡單來說,用這種方法做多重免疫熒光是利用二抗上帶有的HRP(而不是直接偶聯(lián)熒光素),來催化后續(xù)添加入體系的非活性熒光素。熒光素在HRP和過氧化氫的作用下被活化,跟臨近蛋白的酪氨酸殘基共價(jià)偶聯(lián),使得蛋白樣品與熒光素穩(wěn)定結(jié)合。 然后微波處理,前一輪非共價(jià)結(jié)合的抗體被洗掉,共價(jià)結(jié)合的熒光素還留存在樣品上。再換個(gè)一抗來第二輪孵育,周而復(fù)始。等到所有抗體孵育結(jié)束,熒光素都結(jié)合好后,然后去檢測結(jié)果。 MSD平臺(tái)由于其獨(dú)特的電化學(xué)發(fā)光原理,可將許多非特異信號(hào)予以排除,對(duì)于各類生物學(xué)樣本的兼容度高。接觸生物標(biāo)志物

基于luminex平臺(tái)的xMAP技術(shù): Luminex :應(yīng)用熒光編碼微球帶有針對(duì)不同目標(biāo)分子的特異性抗體,不同的微球在一定程度上可以自由組合,這樣在一次實(shí)驗(yàn)中可以同時(shí)完成多個(gè)目標(biāo)分子的分析。 原理: 應(yīng)用微球和流式細(xì)胞儀的原理, 微球內(nèi)部含有三種免疫熒光, 通過熒光不同的比例可以區(qū)分 500 種不同的微球。 每種微球可以用來檢測一種不同的蛋白或基因。 因此, 利用微球技術(shù), 可以同時(shí)檢測高達(dá) 500 個(gè)蛋白或基因。 特點(diǎn): 1、既能檢測蛋白,又能檢測核酸 2、既能用于臨床,又能用于多學(xué)科科研領(lǐng)域 3、真正意義的“高通量”檢測,一次檢測100個(gè)指標(biāo) 4、在準(zhǔn)確度、精確度、靈敏度方面與ELISA均可達(dá)到相似的水平 IL-15 elisa kit檢測服務(wù)Luminex既能檢測蛋白,又能檢測核酸。

酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA) 即將已知的抗原或抗體吸附在固相載體表面,使酶標(biāo)記的抗原抗體反應(yīng)在固相表面進(jìn)行的技術(shù)。 基本原理:它采用抗原與抗體的特異反應(yīng)將待測物與酶連接,然后通過酶與底物產(chǎn)生顏色反應(yīng),用于訂量測定。測定的對(duì)象可以是抗體也可以是抗原。 測量時(shí),抗原(抗體)先結(jié)合在固相載體上,但仍保留其免疫活性,然后加一種抗體(抗原)與酶結(jié)合成的偶聯(lián)物(標(biāo)記物),此偶聯(lián)物仍保留其原免疫活性與酶活性,當(dāng)偶聯(lián)物與固相載體上的抗原(抗體)反應(yīng)結(jié)合后,再加上酶的相應(yīng)底物,即起催化水解或氧化還原反應(yīng)而呈顏色。?其所生成的顏色深淺與欲測的抗原(抗體)含量成正比。這種有色產(chǎn)物可用肉眼、光學(xué)顯微鏡、電子顯微鏡觀察,也可以用分光光度計(jì)(酶標(biāo)儀) 加以測定。其方法簡單,方便迅速,特異性強(qiáng)。?

單細(xì)胞功能組學(xué)(IsoPlexis)技術(shù)優(yōu)勢 >在看似同質(zhì)的細(xì)胞亞群內(nèi)研究異質(zhì)性 >利用功能蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)層和免疫細(xì)胞比較免疫應(yīng)答情況 >通過多功能強(qiáng)度指數(shù)(PSI)建立參考點(diǎn) >優(yōu)化試驗(yàn)以預(yù)測區(qū)分應(yīng)答者和非應(yīng)答者 >表征導(dǎo)致身體狀況 / 應(yīng)答的生物學(xué)和功能驅(qū)動(dòng)因素 技術(shù)原理 采用微流控技術(shù),通過 12,000 個(gè)亞納升級(jí)別的微室同時(shí)捕獲上千個(gè)單細(xì)胞。搭配IsoCode 芯片抗體條形碼技術(shù),捕獲每個(gè)小室中單個(gè)活細(xì)胞分泌的多重蛋白質(zhì),或者對(duì)單細(xì)胞裂解后釋放出的多種磷酸化蛋白進(jìn)行捕獲,然后通過基于 ELISA 原理的全自動(dòng)化蛋白檢測技術(shù),捕獲多重蛋白的熒光信號(hào),一次可采集多達(dá) 30 種以上的功能蛋白質(zhì)。在檢測中從每個(gè)單細(xì)胞獲得的蛋白質(zhì)組信號(hào)將無縫傳輸?shù)?IsoSpeak 生信分析軟件,進(jìn)行全自動(dòng)分析和可視化呈現(xiàn),并可直接用于文章發(fā)表。LabEx提供MSD超敏電化學(xué)發(fā)光平臺(tái)服務(wù)!

LUMINEX常見問題及解答(二) 6) 客戶自己提供抗體,是否可以進(jìn)行LUMINEX檢測? Luminex和ELISA檢測試劑都需要兩個(gè)配套的特異性抗體。我們公司具有開發(fā)Luminex試劑盒的經(jīng)驗(yàn)。但是,需要一系列的開發(fā)工作才能保證結(jié)果的特異性、重復(fù)性和可靠性。 7) 除了蛋白,LUMINEX技術(shù)是否還可以用于其它指標(biāo)的檢測? 可以用于基因表達(dá),基因多態(tài)性和HLA配型分析。 8) 如何判定 LUMINEX數(shù)據(jù)表達(dá)水平差異有無意義? 表達(dá)差異主要取決于標(biāo)本的性質(zhì)和數(shù)量,我們公司為客戶提供專業(yè)的數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)服務(wù)。 9) LUMINEX實(shí)驗(yàn)和流式細(xì)胞儀的優(yōu)劣比較? Luminex技術(shù)是流式細(xì)胞儀和微球相結(jié)合的蛋白、核酸檢測技術(shù), 檢測對(duì)象是蛋白質(zhì)、DNA等大分子。普通流式細(xì)胞儀主要用于檢測整體細(xì)胞表面或細(xì)胞內(nèi)的蛋白表達(dá)情況。Luminex檢測蛋白和標(biāo)本數(shù)目大,是一種高通量檢測技術(shù)。普通流式細(xì)胞儀每次只能檢測幾種蛋白分子,而且檢測速度較慢,不適合高通量分析。 由此可見,兩種方法應(yīng)用方向有很大差別。 細(xì)胞因子檢測是一個(gè)強(qiáng)大的工具,通過定制識(shí)別產(chǎn)生積極反應(yīng)的細(xì)胞因子的獨(dú)特組合。msd多因子檢測儀

LabEx MSD提供了更為便捷快速的實(shí)驗(yàn)流程,通常只需4-5小時(shí),即可完成整個(gè)檢測流程。接觸生物標(biāo)志物

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