熒光法多重免疫組化染色原理

來源: 發(fā)布時間:2022-05-12

單細胞功能組學(xué)(IsoPlexis)技術(shù)優(yōu)勢 >在看似同質(zhì)的細胞亞群內(nèi)研究異質(zhì)性 >利用功能蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)層和免疫細胞比較免疫應(yīng)答情況 >通過多功能強度指數(shù)(PSI)建立參考點 >優(yōu)化試驗以預(yù)測區(qū)分應(yīng)答者和非應(yīng)答者 >表征導(dǎo)致身體狀況 / 應(yīng)答的生物學(xué)和功能驅(qū)動因素 技術(shù)原理 采用微流控技術(shù),通過 12,000 個亞納升級別的微室同時捕獲上千個單細胞。搭配IsoCode 芯片抗體條形碼技術(shù),捕獲每個小室中單個活細胞分泌的多重蛋白質(zhì),或者對單細胞裂解后釋放出的多種磷酸化蛋白進行捕獲,然后通過基于 ELISA 原理的全自動化蛋白檢測技術(shù),捕獲多重蛋白的熒光信號,一次可采集多達 30 種以上的功能蛋白質(zhì)。在檢測中從每個單細胞獲得的蛋白質(zhì)組信號將無縫傳輸?shù)?IsoSpeak 生信分析軟件,進行全自動分析和可視化呈現(xiàn),并可直接用于文章發(fā)表。PCR Array:用于檢測生物學(xué)功能相關(guān)的一系列基因的表達量變化,發(fā)現(xiàn)變化比較明顯的標志性基因。熒光法多重免疫組化染色原理

MSD經(jīng)典10因子 推薦:中檢院《CAR-T細胞醫(yī)治產(chǎn)品質(zhì)量控制檢測研究及非臨床研究考慮要點》中提到,使用MSD技術(shù)檢測CAR-T細胞醫(yī)治后樣本中細胞因子表達來評估藥物的安全性和有效性。 MSD技術(shù)-電化學(xué)發(fā)光和點陣技術(shù) MESOSCALEDISCOVERY公司的ECL(基于石墨微孔板的電化學(xué)發(fā)光免疫分析)技術(shù)是基于ELISA基本原理的升級,在板底通電從而激發(fā)標記物SULFO-TAG發(fā)光并由CCDCamera進行信號采集;MSDECL技術(shù)提高免疫分析的靈敏度,延伸了線性范圍。MSD通過點陣技術(shù),在96孔石墨電極板里可實現(xiàn)10個指標每孔的檢測,同時實現(xiàn)多個指標定量。 MSD技術(shù)獨具一格的“六合一”特點:亞fg/ml靈敏度,低背景,多靶點檢測,6個數(shù)量級線性范圍,適用于不同樣本基質(zhì)(血清/血漿,細胞培養(yǎng)上清,腦脊液,尿液,組織勻漿,細胞裂解液)(人/猴子/小鼠/大鼠), 5-25ul微量樣本檢測。 LabEx提供V-PLEX人、小鼠、大鼠:炎癥反應(yīng)、免疫調(diào)節(jié)、TH1/TH2通路重要指標多因子組合檢測限。試劑我們提供;檢測我們來做,助您的時間更有價值!熒光法多重免疫組化染色原理LabEx提供 Luminex---xMAP技術(shù)。

酶聯(lián)免疫斑點技術(shù)(Elispot)技術(shù)優(yōu)勢 (1) 單細胞水平,活細胞功能檢測:彌補了體液中CK半衰期短的不足,當體液中某CK含量較低時,用ELISPOT 法檢測具有較高靈敏性。 (2) 操作簡便經(jīng)濟,可以進行高通量篩選:既可檢測自發(fā)分泌細胞,又可檢測抗原特異性CK分泌細胞,具有較高特異性,并可觀察藥物治療反應(yīng),且使對CSF中T、B細胞研究成為可能,對神經(jīng)免疫疾病發(fā)病機制研究及臨床療效觀察均有重要價值。 (3)靈敏度高:在一百萬個陰性細胞中只要有一個分泌細胞因子的陽性細胞即可被檢測出來。靈敏度比傳統(tǒng)ELISA方法高2-3個數(shù)量級。

液態(tài)流式技術(shù)(Luminex) 流式熒光,又稱懸浮陣列、液相芯片等,是近20多年逐漸發(fā)展起來的多指標聯(lián)合診斷技術(shù)。該技術(shù)以熒光編碼微球為中心,集流式 原理、激光分析、高速數(shù)字信號處理等多種技術(shù)于一體,多指標并行分析,可一管同時準確定量檢測2-100種不同的生物分子; 具有高通量、高靈敏度、并行檢測等特點;可用于免疫分析、核酸研究、酶學(xué)分析、受體、配體識別分析等多方面、多領(lǐng)域的研究。 基本原理: 應(yīng)用微球和流式細胞儀的原理,微球內(nèi)部含有三種免疫熒光,通過熒光不同的比例可以區(qū)分100種不同的微球。每種微球可以用 來檢測一種不同的蛋白或基因。因此,利用微球技術(shù),可以同時檢測高達100個蛋白或基因。 Luminex技術(shù)的測量結(jié)果在準確度、精確度、靈敏度方面與ELISA均可達到相似的水平。Luminex應(yīng)用的熒光編碼微球帶有針對 不同目標分子的特異性抗體,不同的微球在一定程度上可以自由組合,這樣在一次實驗中可以同時完成多個目標分子的分析。多 目標分子的同時測定可以減少生物樣品的消耗量,節(jié)省成本和測定時間,并且使多種目標分子之間相關(guān)性的分析更加準確。LabEx提供高通量蛋白組學(xué)(Olink)服務(wù)!

問:因子檢測技術(shù)有哪些? 答: Array抗體芯片、CBA、luminex、MSD。 問:多因子實驗適用的樣本類型有哪些? 答: Serum(血清)、Plasma(血漿)、Cell/ Tissue lysate(細胞/組織裂解液)、Cerebrospinal Fluid(腦脊液)、支氣管肺泡灌洗液、鼻腔灌洗液、腹腔液等等。 問:如何計算96孔板可做多少樣本? 答: 標曲16孔,預(yù)實驗8孔,剩余72孔,單孔可做72樣本,復(fù)孔可做36樣本; 問:多因子實驗的正式實驗,是否可以分批次檢測? 答: 可以,但是有如下要注意: (1)CBA:試劑盒須在一個月內(nèi)用完,否則標準曲線要重做,重做就要用到試劑,那樣本就樣減少。 (2)Luminex:每次都必須要做標準曲線,會浪費試劑和孔板,同時試劑也要在一個月內(nèi)用完,防止試劑過期。 (3)MSD:每次都必須要做標準曲線,會浪費試劑和孔板,同時試劑在一個月內(nèi)用完,防止試劑過期,每次送樣+標準曲線的數(shù)量,建議是4的倍數(shù),否則會造成浪費。 LabEx提供 Luminex——xMAP技術(shù)—微球。IL-9檢測服務(wù)

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基于MSD平臺 的電化學(xué)發(fā)光超敏多因子檢測技術(shù) MSD(Meso Scale Discovery)原理: MSD電化學(xué)發(fā)光技術(shù)主要基于超敏多因子電化學(xué)發(fā)光分析儀MESO Sector 600或Quickplex SQ 120。通過點陣技術(shù),在96孔石墨電極板里可 實現(xiàn)10個指標每孔的檢測。也可在24孔板里 定制實現(xiàn)100指標/孔的篩選檢測。 特點: 1、更高靈敏度與更寬的線性范圍:靈敏度可達0.05pg/ml,有效線性范圍達6 log。 2、節(jié)省樣本用量,可實現(xiàn)多重檢測:上樣量≤25ul,為珍稀樣本的研究提供了更多的數(shù)據(jù)。 3、均一性、重復(fù)性高:板內(nèi)CV<6-8%,板間<10%,批間<15%。同時MSD試劑盒有效期長達30個月,為長時間研究項目,提供了使用同一批號試劑的可能性。 4、樣本兼容度高,基質(zhì)效應(yīng)小 5、實驗流程簡便、快速、多元化 6、信號穩(wěn)定且不受顯色順序影響 7、開放性平臺,高載量的石墨電極,多樣化實驗方案,更節(jié)省的包被用量。 熒光法多重免疫組化染色原理

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