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來源: 發(fā)布時間:2022-06-30

問:因子檢測技術(shù)有哪些?答:Array抗體芯片、CBA、luminex、MSD。問:多因子實驗適用的樣本類型有哪些?答:Serum(血清)、Plasma(血漿)、Cell/Tissuelysate(細胞/組織裂解液)、CerebrospinalFluid(腦脊液)、支氣管肺泡灌洗液、鼻腔灌洗液、腹腔液等等。問:如何計算96孔板可做多少樣本?答:標曲16孔,預(yù)實驗8孔,剩余72孔,單孔可做72樣本,復(fù)孔可做36樣本;問:多因子實驗的正式實驗,是否可以分批次檢測?答:可以,但是有如下要注意:(1)CBA:試劑盒須在一個月內(nèi)用完,否則標準曲線要重做,重做就要用到試劑,那樣本就樣減少。(2)Luminex:每次都必須要做標準曲線,會浪費試劑和孔板,同時試劑也要在一個月內(nèi)用完,防止試劑過期。(3)MSD:每次都必須要做標準曲線,會浪費試劑和孔板,同時試劑在一個月內(nèi)用完,防止試劑過期,每次送樣+標準曲線的數(shù)量,建議是4的倍數(shù),否則會造成浪費。LabEx提供蛋白水平檢測服務(wù)!美天旎nk磁珠分選

流式多因子檢測技術(shù)(CBA)微球免疫分析系統(tǒng)CBA(CytometricBeadArray)是一個基于流式細胞檢測系統(tǒng)的多重蛋白定量檢測方法,它能夠同時對單個樣品中的多個指標進行檢測。CBA是種結(jié)合流式細胞儀熒光檢測和微球免疫分析的應(yīng)用技術(shù),可以輕松的在短時間內(nèi),同時檢測多種蛋白,其作用原理利用熒光強度不同的微球,上面帶有可以辨認特定蛋白的抗體(captureantibody),與樣本(例如血清、血漿、培養(yǎng)上清液、細胞裂解液等)及PE檢測抗體(detectionantibody)作用后,以流式細胞儀進行分析,根據(jù)PE熒光強度的不同用FCAPArray軟件進行分析和標準品做比對后,可進行樣本內(nèi)特定,蛋白的定性或定量。CBA具有以下優(yōu)點:每次檢測需25-50ul樣本;靈敏度可達0.274pg/ml時間t夬速,需3-4小時,快速上樣可同時測定30種蛋白,實驗可重復(fù)性高利用FCAPArray軟件,不論樣本數(shù)目多少,可快速分析完成分析乙烯抗體芯片結(jié)構(gòu)圖樣本兼容度高:可兼容血清/血漿、細胞上清、細胞/組織裂解液、腦脊液等多種生物學(xué)體液。

產(chǎn)生組織切片非特異性染色的原因有哪些?如何解決?1)、抗體孵育時間過長、抗體濃度高易增加背景著色。這可通過縮短一抗/二抗孵育時間、稀釋抗體來控制。這是尤其重要的一條。2)、一抗用多克隆抗體易出現(xiàn)非特異性著色,建議試用單克隆抗體看看。3)、內(nèi)源性過氧化物酶和生物素在肝臟、腎臟等組織含量很高(含血細胞多的組織),需要通過延長滅活時間和增加滅活劑濃度來降低背景染色;4)、非特異性組分與抗體結(jié)合,這需要通過延長二抗來源的動物免疫血清封閉時間和適當增加濃度來加強封閉效果;5)、DAB孵育時間過長或濃度過高;6)、PBS沖洗不充分,殘留抗體結(jié)果增強著色,在一抗/二抗/SP孵育后的浸洗尤為重要;7)、標本染色過程中經(jīng)常出現(xiàn)干片,這容易增強非特異性著色。

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免疫組化技術(shù)是用標記物標記的抗體與組織或細胞的抗原(如蛋白質(zhì)、多肽、酶、***、病原體以及受體等)反應(yīng),結(jié)合形態(tài)學(xué)檢查,對抗原作定性、定量、定位檢測的技術(shù)。目前通常選用免疫酶組化間接染色法進行實驗,利用該技術(shù)可進行細胞、亞細胞水平的檢測。**近幾年,分子生物學(xué)研究異?;钴S,但**終還要歸到形態(tài)上來。用免疫組織化學(xué)方法對所研究的大分子進行定位,進而深入研究其功能。分類:免疫組織化學(xué)技術(shù)按照標記物的種類可分為免疫熒光法、免疫酶法、免疫鐵蛋白法、免疫金法及放射免疫自顯影法等特點:具有特異性強、靈敏度高及能將形態(tài)研究與功能、代謝研究有機地結(jié)合在一起實驗標本:實驗所用主要為組織標本和細胞標本兩大類,前者包括石蠟切片(病理切片和組織芯片)和冰凍切片,后者包括組織印片、細胞爬片和細胞涂片??贵w:免疫組化實驗中常用的抗體為單克隆抗體和多克隆抗體高通量蛋白組學(xué)(Olink)采用獨有的 PEA,鄰位延伸分析技術(shù)檢測蛋白標志物。美天旎nk磁珠分選

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LabEx可提供的服務(wù)及優(yōu)勢(一)LabEx服務(wù)的優(yōu)勢:1、專業(yè)的抗體公司;2、先進的實驗儀器平臺;3、可靠、放心的結(jié)果;4、實惠、親民的價格;5、認真、嚴謹?shù)墓ぷ鲬B(tài)度。ELISA:將已知的抗原或抗體吸附在固相載體表面,使酶標記的抗原抗體反應(yīng)在固相表面進行的技術(shù)。該技術(shù)可用于檢測大分子抗原和特異性抗體等,具有快速、靈敏、簡便、載體易于標準化等優(yōu)點。流式檢測服務(wù):流式細胞儀是對細胞進行自動分析和分選的裝置,它可以快速測量、存貯、顯示懸浮在液體中的分散細胞的一系列重要的生物物理、生物化學(xué)方面的特征參量。并可以根據(jù)預(yù)選的參量范圍把指定的細胞亞群從中分選出來。抗體芯片:具有微型化、集成化、高通量的特點,可以用于檢測某一特定的生理或病理過程相關(guān)蛋白的表達豐度,目前主要用于信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、蛋白組學(xué)、腫塊物及其他疾病的相關(guān)研究。美天旎nk磁珠分選

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