液態(tài)流式技術(shù)(Luminex)特點(diǎn):多重檢測:理論上可同時檢測100種生物靶標(biāo)。節(jié)省樣品:只需低至25μl的樣品體積。高靈敏度:精確定量下限低至0.1pg/mL。應(yīng)用范圍應(yīng)用領(lǐng)域:免疫、炎癥、心血管疾病、腫塊物研究、腎、代謝、神經(jīng)、細(xì)胞間作用。分析物類型:細(xì)胞因子、炎癥因子、趨化因子、粘附因子、脂肪因子、血管生成蛋白、腫塊物標(biāo)記物、基質(zhì)金屬蛋白酶、基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑。其他應(yīng)用:信號通路、重大疾病相關(guān)、Biomarker開發(fā)、臨床應(yīng)用。LabEx多因子檢測技術(shù)--液相懸浮技術(shù)??贵w芯片制備
Q:多因子實驗還用的樣本類型有可些?A:Serum(血清)、Plasma(血漿)、Cell/Tissuelysate(細(xì)胞/組織裂解液)、CerebrospinalFluid(腦脊液)、BronchoalveolarLavageFluid(支氣管肺泡灌洗液)、NasalLavage(鼻腔灌洗液)、FluidPeritonealFluid(腹腔液)等等。Q:多因子實驗中血清好檢測,還是血漿好檢測?A:文獻(xiàn)報道EDTA的血漿適合做多因子實驗,具體需研究者根據(jù)自己實際條件選擇。Q:為什么要做預(yù)實驗?A:試劑說明書中的樣本稀釋比例不精確,需要進(jìn)一步確認(rèn)。預(yù)實驗主要目的∶1.確定好較好稀釋比例,讓盡可能多的因子在檢測范圍內(nèi),從而提高檢出率。2.避免樣本濃度過高,導(dǎo)致結(jié)果不準(zhǔn)確。3.讓研究者在正式實驗中有選擇的依據(jù)。Q:血清血聚溶血,對實驗結(jié)果有形響嗎?A:肯定有影響。溶血是紅細(xì)胞破裂導(dǎo)致的,輕微溶血都是可以接受,但從溶血的嚴(yán)重程度看區(qū)別較大,樣本普遍存在些許溶血情況,從目前文獻(xiàn)上看沒有明確的數(shù)據(jù)支持。流式熒光抗體生物標(biāo)志物開發(fā)與研究。
LUMINEX常見問題及解答(二)6)客戶自己提供抗體,是否可以進(jìn)行LUMINEX檢測?Luminex和ELISA檢測試劑都需要兩個配套的特異性抗體。我們公司具有開發(fā)Luminex試劑盒的經(jīng)驗。但是,需要一系列的開發(fā)工作才能保證結(jié)果的特異性、重復(fù)性和可靠性。7)除了蛋白,LUMINEX技術(shù)是否還可以用于其它指標(biāo)的檢測?可以用于基因表達(dá),基因多態(tài)性和HLA配型分析。8)如何判定LUMINEX數(shù)據(jù)表達(dá)水平差異有無意義?表達(dá)差異主要取決于標(biāo)本的性質(zhì)和數(shù)量,我們公司為客戶提供專業(yè)的數(shù)據(jù)統(tǒng)計服務(wù)。9)LUMINEX實驗和流式細(xì)胞儀的優(yōu)劣比較?Luminex技術(shù)是流式細(xì)胞儀和微球相結(jié)合的蛋白、核酸檢測技術(shù),檢測對象是蛋白質(zhì)、DNA等大分子。普通流式細(xì)胞儀主要用于檢測整體細(xì)胞表面或細(xì)胞內(nèi)的蛋白表達(dá)情況。Luminex檢測蛋白和標(biāo)本數(shù)目大,是一種高通量檢測技術(shù)。普通流式細(xì)胞儀每次只能檢測幾種蛋白分子,而且檢測速度較慢,不適合高通量分析。由此可見,兩種方法應(yīng)用方向有很大差別。
基于luminex平臺的xMAP技術(shù):Luminex:應(yīng)用熒光編碼微球帶有針對不同目標(biāo)分子的特異性抗體,不同的微球在一定程度上可以自由組合,這樣在一次實驗中可以同時完成多個目標(biāo)分子的分析。原理:應(yīng)用微球和流式細(xì)胞儀的原理,微球內(nèi)部含有三種免疫熒光,通過熒光不同的比例可以區(qū)分500種不同的微球。每種微球可以用來檢測一種不同的蛋白或基因。因此,利用微球技術(shù),可以同時檢測高達(dá)500個蛋白或基因。特點(diǎn):1、既能檢測蛋白,又能檢測核酸2、既能用于臨床,又能用于多學(xué)科科研領(lǐng)域3、真正意義的“高通量”檢測,一次檢測100個指標(biāo)4、在準(zhǔn)確度、精確度、靈敏度方面與ELISA均可達(dá)到相似的水平LabEx實驗服務(wù)項目涵蓋:基因蛋白細(xì)胞組織四個層面。
問:因子檢測技術(shù)有哪些?答:Array抗體芯片、CBA、luminex、MSD。問:多因子實驗適用的樣本類型有哪些?答:Serum(血清)、Plasma(血漿)、Cell/Tissuelysate(細(xì)胞/組織裂解液)、CerebrospinalFluid(腦脊液)、支氣管肺泡灌洗液、鼻腔灌洗液、腹腔液等等。問:如何計算96孔板可做多少樣本?答:標(biāo)曲16孔,預(yù)實驗8孔,剩余72孔,單孔可做72樣本,復(fù)孔可做36樣本;問:多因子實驗的正式實驗,是否可以分批次檢測?答:可以,但是有如下要注意:(1)CBA:試劑盒須在一個月內(nèi)用完,否則標(biāo)準(zhǔn)曲線要重做,重做就要用到試劑,那樣本就樣減少。(2)Luminex:每次都必須要做標(biāo)準(zhǔn)曲線,會浪費(fèi)試劑和孔板,同時試劑也要在一個月內(nèi)用完,防止試劑過期。(3)MSD:每次都必須要做標(biāo)準(zhǔn)曲線,會浪費(fèi)試劑和孔板,同時試劑在一個月內(nèi)用完,防止試劑過期,每次送樣+標(biāo)準(zhǔn)曲線的數(shù)量,建議是4的倍數(shù),否則會造成浪費(fèi)。LabEx提供MSD超敏電化學(xué)發(fā)光平臺服務(wù)!igf 1信號通路
LabEx提供 Luminex——xMAP技術(shù)—微球??贵w芯片制備
蛋白分析實驗技術(shù)1、MSD超敏電化學(xué)發(fā)光平臺針對550位北美和歐洲的生物醫(yī)藥研究人員的報告中顯示,基于電化學(xué)發(fā)光技術(shù)的MSD(MesoScaleDiscovery)是較受歡迎的5大免疫分析品牌之一??蓪esternBlot從16小時縮短至4.5小時。基本原理:電化學(xué)發(fā)光是一種在電極表面由電化學(xué)引發(fā)的特異性化學(xué)發(fā)光反應(yīng),是電化學(xué)和化學(xué)發(fā)光兩個過程的完美結(jié)合。MSD電化學(xué)發(fā)光檢測技術(shù)使用SULFO-TAGTM標(biāo)記物,在MULTI-ARRAY和MULTI-SPORT微孔板的電極表面通電后,電化學(xué)作用激發(fā)SULFO-TAGTM標(biāo)記物發(fā)出強(qiáng)光??贵w芯片制備
上海樂備實生物技術(shù)有限公司致力于醫(yī)藥健康,是一家生產(chǎn)型的公司。公司業(yè)務(wù)分為標(biāo)志物篩查,多因子檢測,Luminex檢測,MSD技術(shù)服務(wù)等,目前不斷進(jìn)行創(chuàng)新和服務(wù)改進(jìn),為客戶提供良好的產(chǎn)品和服務(wù)。公司秉持誠信為本的經(jīng)營理念,在醫(yī)藥健康深耕多年,以技術(shù)為先導(dǎo),以自主產(chǎn)品為重點(diǎn),發(fā)揮人才優(yōu)勢,打造醫(yī)藥健康良好品牌。在社會各界的鼎力支持下,持續(xù)創(chuàng)新,不斷鑄造高品質(zhì)服務(wù)體驗,為客戶成功提供堅實有力的支持。