產(chǎn)生組織切片非特異性染色的原因有哪些?如何解決?1)、抗體孵育時(shí)間過(guò)長(zhǎng)、抗體濃度高易增加背景著色。這可通過(guò)縮短一抗/二抗孵育時(shí)間、稀釋抗體來(lái)控制。這是尤其重要的一條。2)、一抗用多克隆抗體易出現(xiàn)非特異性著色,建議試用單克隆抗體看看。3)、內(nèi)源性過(guò)氧化物酶和生物素在肝臟、腎臟等組織含量很高(含血細(xì)胞多的組織),需要通過(guò)延長(zhǎng)滅活時(shí)間和增加滅活劑濃度來(lái)降低背景染色;4)、非特異性組分與抗體結(jié)合,這需要通過(guò)延長(zhǎng)二抗來(lái)源的動(dòng)物免疫血清封閉時(shí)間和適當(dāng)增加濃度來(lái)加強(qiáng)封閉效果;5)、DAB孵育時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或濃度過(guò)高;6)、PBS沖洗不充分,殘留抗體結(jié)果增強(qiáng)著色,在一抗/二抗/SP孵育后的浸洗尤為重要;7)、標(biāo)本染色過(guò)程中經(jīng)常出現(xiàn)干片,這容易增強(qiáng)非特異性著色。LabEx 因子檢測(cè)技術(shù)有Array抗體芯片、CBA、luminex、MSD等。FGF23
流式細(xì)胞分析LabEx始終致力于為您的研究需要,提供前沿的多因子技術(shù)平臺(tái),用心服務(wù),現(xiàn)有囊括基因、蛋白、組織、細(xì)胞水平包括PCRArray、ELISA,MSD、Luminex、CBA,抗體芯片、多色流式、mIHC及HALO分析等12個(gè)專(zhuān)業(yè)的實(shí)驗(yàn)室技術(shù)平臺(tái),助推科研進(jìn)步!流式細(xì)胞術(shù)(flowcytometry,F(xiàn)CM)是一項(xiàng)新型的、發(fā)展迅速的生物醫(yī)學(xué)分析技術(shù),它是集激光技術(shù)、光電測(cè)量技術(shù)、計(jì)算機(jī)技術(shù)、流體力學(xué)以及細(xì)胞免疫熒光化學(xué)技術(shù)、單克隆抗體技術(shù)為一體的新型高科技細(xì)胞分析技術(shù)。技術(shù)原理流式細(xì)胞儀是應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)建立起來(lái)的儀器裝置。它使細(xì)胞或微粒在液流中流動(dòng),逐個(gè)通過(guò)一入射光束,并用高靈敏度檢測(cè)器記錄下散射光及各種熒光信號(hào),從而得以對(duì)粒子進(jìn)行多參數(shù)分析,包括諸如粒子形狀和大小、細(xì)胞周期、細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞因子、細(xì)菌表面抗原、細(xì)胞DNA內(nèi)含物等。FCM檢測(cè)的粒子一般為活性細(xì)胞,通過(guò)激光光源激發(fā)細(xì)胞上所標(biāo)記的熒光物質(zhì)的強(qiáng)度和顏色以及散射光的強(qiáng)度可以得到細(xì)胞內(nèi)部各種各樣的生物信息。Visfatin液態(tài)流式技術(shù)(Luminex),流式熒光,又稱(chēng)懸浮陣列、液相芯片等。
問(wèn):因子檢測(cè)技術(shù)有哪些?答:Array抗體芯片、CBA、luminex、MSD。問(wèn):多因子實(shí)驗(yàn)適用的樣本類(lèi)型有哪些?答:Serum(血清)、Plasma(血漿)、Cell/Tissuelysate(細(xì)胞/組織裂解液)、CerebrospinalFluid(腦脊液)、支氣管肺泡灌洗液、鼻腔灌洗液、腹腔液等等。問(wèn):如何計(jì)算96孔板可做多少樣本?答:標(biāo)曲16孔,預(yù)實(shí)驗(yàn)8孔,剩余72孔,單孔可做72樣本,復(fù)孔可做36樣本;問(wèn):多因子實(shí)驗(yàn)的正式實(shí)驗(yàn),是否可以分批次檢測(cè)?答:可以,但是有如下要注意:(1)CBA:試劑盒須在一個(gè)月內(nèi)用完,否則標(biāo)準(zhǔn)曲線要重做,重做就要用到試劑,那樣本就樣減少。(2)Luminex:每次都必須要做標(biāo)準(zhǔn)曲線,會(huì)浪費(fèi)試劑和孔板,同時(shí)試劑也要在一個(gè)月內(nèi)用完,防止試劑過(guò)期。(3)MSD:每次都必須要做標(biāo)準(zhǔn)曲線,會(huì)浪費(fèi)試劑和孔板,同時(shí)試劑在一個(gè)月內(nèi)用完,防止試劑過(guò)期,每次送樣+標(biāo)準(zhǔn)曲線的數(shù)量,建議是4的倍數(shù),否則會(huì)造成浪費(fèi)。
Q:多因子實(shí)驗(yàn)還用的樣本類(lèi)型有可些?A:Serum(血清)、Plasma(血漿)、Cell/Tissuelysate(細(xì)胞/組織裂解液)、CerebrospinalFluid(腦脊液)、BronchoalveolarLavageFluid(支氣管肺泡灌洗液)、NasalLavage(鼻腔灌洗液)、FluidPeritonealFluid(腹腔液)等等。Q:多因子實(shí)驗(yàn)中血清好檢測(cè),還是血漿好檢測(cè)?A:文獻(xiàn)報(bào)道EDTA的血漿適合做多因子實(shí)驗(yàn),具體需研究者根據(jù)自己實(shí)際條件選擇。Q:為什么要做預(yù)實(shí)驗(yàn)?A:試劑說(shuō)明書(shū)中的樣本稀釋比例不精確,需要進(jìn)一步確認(rèn)。預(yù)實(shí)驗(yàn)主要目的∶1.確定好較好稀釋比例,讓盡可能多的因子在檢測(cè)范圍內(nèi),從而提高檢出率。2.避免樣本濃度過(guò)高,導(dǎo)致結(jié)果不準(zhǔn)確。3.讓研究者在正式實(shí)驗(yàn)中有選擇的依據(jù)。Q:血清血聚溶血,對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果有形響嗎?A:肯定有影響。溶血是紅細(xì)胞破裂導(dǎo)致的,輕微溶血都是可以接受,但從溶血的嚴(yán)重程度看區(qū)別較大,樣本普遍存在些許溶血情況,從目前文獻(xiàn)上看沒(méi)有明確的數(shù)據(jù)支持。細(xì)胞因子的檢測(cè)常常被用作各項(xiàng)疾病中預(yù)測(cè)免疫反應(yīng)強(qiáng)度的生物標(biāo)志物。
HALO分析平臺(tái)LabEx始終致力于為您的研究需要,提供前沿的多因子技術(shù)平臺(tái),用心服務(wù),現(xiàn)有囊括基因、蛋白、組織、細(xì)胞水平包括PCRArray、ELISA,MSD、Luminex、CBA,抗體芯片、多色流式、mIHC及HALO分析等12個(gè)專(zhuān)業(yè)的實(shí)驗(yàn)室技術(shù)平臺(tái),助推科研進(jìn)步!技術(shù)介紹LabEx數(shù)字病理圖像分析平臺(tái),為您提供病理圖像分析的全套解決方案,包括可進(jìn)行高通量、全切片式的組織分析的圖像分析的病理圖像分析平臺(tái)HALO。憑借其易用性和可擴(kuò)展性,在免疫腫塊物學(xué)、腫塊物學(xué)、移植科學(xué)、神經(jīng)科學(xué)、眼科、代謝、呼吸和病理學(xué)等領(lǐng)域有著較廣的應(yīng)用。目前HALO數(shù)字病理圖像分析平臺(tái)用戶(hù)遍布于全球的生物制藥公司、醫(yī)療和研究組織。LabEx提供28種抗體芯片,用于人,小鼠和大鼠物種的蛋白檢測(cè)。Myeloblastin
LabEx多因子檢測(cè)技術(shù)(包括luminex、MSD等),所需樣本量少,檢測(cè)指標(biāo)豐富。FGF23
抗體蛋白質(zhì)芯片技術(shù)(Sengenics)優(yōu)勢(shì)1、包被蛋白具有正確折疊的空間結(jié)構(gòu)/芯片表面水凝膠保護(hù)2、特異性蛋白質(zhì)陣列上正確折疊的蛋白質(zhì)可確保構(gòu)象表位,可用于自身抗體結(jié)合(90%的抗體表位是非線性的)。與顯示低信噪比的其他陣列相比,這會(huì)帶來(lái)特定的命中和低背景噪音。3、檢測(cè)限<10pg/ml蛋白質(zhì)陣列可用于以極高的靈敏度檢測(cè)自身抗體,只需要1-10μL血清。檢測(cè)限在10pg/ml范圍內(nèi),線性動(dòng)態(tài)范圍至少為5個(gè)數(shù)量級(jí)。4、高重復(fù)性Sengenics蛋白質(zhì)陣列使用多個(gè)陽(yáng)性和陰性對(duì)照來(lái)測(cè)量研究和批次內(nèi)和之間的重復(fù)性。下圖顯示在比較兩個(gè)不同批次中的6524個(gè)蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)點(diǎn)的自身抗體水平時(shí),0.97以上的近乎完美的Pearson相關(guān)性。5、一致性高SengenicsKREXTM蛋白質(zhì)折疊技術(shù)用于創(chuàng)建具有一致性的蛋白質(zhì)陣列。下圖顯示了Immunome蛋白質(zhì)陣列的蛋白質(zhì)內(nèi)復(fù)制變異系數(shù)(CV%)百分比。Immunome的平均CV%為7.2%。FGF23
上海樂(lè)備實(shí)生物技術(shù)有限公司致力于醫(yī)藥健康,是一家生產(chǎn)型公司。樂(lè)備實(shí)生物致力于為客戶(hù)提供良好的標(biāo)志物篩查,多因子檢測(cè),Luminex檢測(cè),MSD技術(shù)服務(wù),一切以用戶(hù)需求為中心,深受廣大客戶(hù)的歡迎。公司秉持誠(chéng)信為本的經(jīng)營(yíng)理念,在醫(yī)藥健康深耕多年,以技術(shù)為先導(dǎo),以自主產(chǎn)品為重點(diǎn),發(fā)揮人才優(yōu)勢(shì),打造醫(yī)藥健康良好品牌。在社會(huì)各界的鼎力支持下,持續(xù)創(chuàng)新,不斷鑄造高質(zhì)量服務(wù)體驗(yàn),為客戶(hù)成功提供堅(jiān)實(shí)有力的支持。