HBEGF

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2022-08-14

產(chǎn)生組織切片非特異性染色的原因有哪些?如何解決?1)、抗體孵育時(shí)間過(guò)長(zhǎng)、抗體濃度高易增加背景著色。這可通過(guò)縮短一抗/二抗孵育時(shí)間、稀釋抗體來(lái)控制。這是尤其重要的一條。2)、一抗用多克隆抗體易出現(xiàn)非特異性著色,建議試用單克隆抗體看看。3)、內(nèi)源性過(guò)氧化物酶和生物素在肝臟、腎臟等組織含量很高(含血細(xì)胞多的組織),需要通過(guò)延長(zhǎng)滅活時(shí)間和增加滅活劑濃度來(lái)降低背景染色;4)、非特異性組分與抗體結(jié)合,這需要通過(guò)延長(zhǎng)二抗來(lái)源的動(dòng)物免疫血清封閉時(shí)間和適當(dāng)增加濃度來(lái)加強(qiáng)封閉效果;5)、DAB孵育時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或濃度過(guò)高;6)、PBS沖洗不充分,殘留抗體結(jié)果增強(qiáng)著色,在一抗/二抗/SP孵育后的浸洗尤為重要;7)、標(biāo)本染色過(guò)程中經(jīng)常出現(xiàn)干片,這容易增強(qiáng)非特異性著色。CBA,細(xì)胞因子微球檢測(cè)技術(shù),是一個(gè)基于流式細(xì)胞檢測(cè)系統(tǒng)的多重蛋白定量檢測(cè)方法。HBEGF

LUMINEX常見(jiàn)問(wèn)題及解答(一)1)LUMINEX應(yīng)用于哪些領(lǐng)域?生物醫(yī)學(xué)研究,生物標(biāo)記物開(kāi)發(fā),臨床檢測(cè)等領(lǐng)域。Luminex技術(shù)主要用于蛋白和核酸檢測(cè)分析。2)LUMINEX敏感性如何?靈敏度取決于開(kāi)頭的質(zhì)量。對(duì)于同樣的抗體對(duì),Luminex檢測(cè)的靈敏度高于ELISA技術(shù)。一般檢測(cè)靈敏度在pg級(jí)。3)對(duì)不同類(lèi)型的樣品制備和樣品量的要求是怎樣的?血清、血漿是常用的樣本,每次檢測(cè)需要10ul,每次可以檢測(cè)多個(gè)蛋白。從各種細(xì)胞或組織中提取的蛋白也可以用Luminex技術(shù)檢測(cè),制備方法與ELISA、WesternBlot完全一樣。4)一般可以檢測(cè)到多少基因或蛋白的表達(dá)信息?檢測(cè)蛋白和基因的數(shù)目主要取決于試劑盒。蛋白質(zhì)檢測(cè)目前可以達(dá)到50個(gè)左右,基因檢測(cè)可達(dá)500個(gè)。5)如何保證檢測(cè)結(jié)果的特異性?檢測(cè)的特異性取決于抗體高特異性。試劑幾乎全部來(lái)源于美國(guó)大公司,產(chǎn)品經(jīng)過(guò)了嚴(yán)格的質(zhì)量控制。同時(shí),我們檢測(cè)公司也有近15年的經(jīng)驗(yàn)、嚴(yán)格的操作程序和質(zhì)量控制體系。MIP-4LabEx多因子檢測(cè)技術(shù)應(yīng)用。

1)除了蛋白,LUMINEX技術(shù)是否還可以用于其它指標(biāo)的檢測(cè)?可以用于基因表達(dá),基因多態(tài)性和HLA配型分析。2)如何判定LUMINEX數(shù)據(jù)表達(dá)水平差異有無(wú)意義?表達(dá)差異主要取決于標(biāo)本的性質(zhì)和數(shù)量,我們公司為客戶提供專(zhuān)業(yè)的數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)服務(wù)。3)LUMINEX實(shí)驗(yàn)和流式細(xì)胞儀的優(yōu)劣比較?Luminex技術(shù)是流式細(xì)胞儀和微球相結(jié)合的蛋白、核酸檢測(cè)技術(shù),檢測(cè)對(duì)象是蛋白質(zhì)、DNA等大分子。普通流式細(xì)胞儀主要用于檢測(cè)整體細(xì)胞表面或細(xì)胞內(nèi)的蛋白表達(dá)情況。Luminex檢測(cè)蛋白和標(biāo)本數(shù)目大,是一種高通量檢測(cè)技術(shù)。普通流式細(xì)胞儀每次只能檢測(cè)幾種蛋白分子,而且檢測(cè)速度較慢,不適合高通量分析。由此可見(jiàn),兩種方法應(yīng)用方向有很大差別。4)如何控制LUMINEX檢測(cè)的質(zhì)量?我們對(duì)每一次檢測(cè)都設(shè)定標(biāo)準(zhǔn)曲線,并設(shè)定內(nèi)參進(jìn)行校正。我們會(huì)定期做儀器校正,檢測(cè)精密度和重復(fù)性實(shí)驗(yàn)以確保檢測(cè)結(jié)果的可靠性。

酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)即將已知的抗原或抗體吸附在固相載體表面,使酶標(biāo)記的抗原抗體反應(yīng)在固相表面進(jìn)行的技術(shù)?;驹恚核捎每乖c抗體的特異反應(yīng)將待測(cè)物與酶連接,然后通過(guò)酶與底物產(chǎn)生顏色反應(yīng),用于訂量測(cè)定。測(cè)定的對(duì)象可以是抗體也可以是抗原。測(cè)量時(shí),抗原(抗體)先結(jié)合在固相載體上,但仍保留其免疫活性,然后加一種抗體(抗原)與酶結(jié)合成的偶聯(lián)物(標(biāo)記物),此偶聯(lián)物仍保留其原免疫活性與酶活性,當(dāng)偶聯(lián)物與固相載體上的抗原(抗體)反應(yīng)結(jié)合后,再加上酶的相應(yīng)底物,即起催化水解或氧化還原反應(yīng)而呈顏色。其所生成的顏色深淺與欲測(cè)的抗原(抗體)含量成正比。這種有色產(chǎn)物可用肉眼、光學(xué)顯微鏡、電子顯微鏡觀察,也可以用分光光度計(jì)(酶標(biāo)儀)加以測(cè)定。其方法簡(jiǎn)單,方便迅速,特異性強(qiáng)。LabEx 提供人、小鼠、大鼠:炎癥反應(yīng)、免疫調(diào)節(jié)、信號(hào)通路重要指標(biāo)多因子組合檢測(cè)。

LabEx隆重推出抗體相關(guān)服務(wù):FC、ELISA、多因子檢測(cè)、抗體芯片……酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(enzyme-linkedimmunosorbentassay簡(jiǎn)稱(chēng)ELISA)是在免疫酶技術(shù)(immunoenzymatictechniques)的基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的一種新型的免疫測(cè)定技術(shù),ELISA過(guò)程包括抗原(抗體)吸附在固相載體上稱(chēng)為包被,加待測(cè)抗體(抗原),再加相應(yīng)酶標(biāo)記抗體(抗原),生成抗原(抗體)--待測(cè)抗體(抗原)--酶標(biāo)記抗體的復(fù)合物,再與該酶的底物反應(yīng)生成有色產(chǎn)物。借助分光光度計(jì)的光吸收計(jì)算抗體(抗原)的量。待測(cè)抗體(抗原)的定量與有色產(chǎn)生成正比。LabEx多因子檢測(cè)技術(shù)--液相懸浮技術(shù)。黏膜生長(zhǎng)因子

LabEx提供MSD超敏電化學(xué)發(fā)光平臺(tái)服務(wù)!HBEGF

流式多因子檢測(cè)技術(shù)(CBA)微球免疫分析系統(tǒng)CBA(CytometricBeadArray)是一個(gè)基于流式細(xì)胞檢測(cè)系統(tǒng)的多重蛋白定量檢測(cè)方法,它能夠同時(shí)對(duì)單個(gè)樣品中的多個(gè)指標(biāo)進(jìn)行檢測(cè)。CBA是種結(jié)合流式細(xì)胞儀熒光檢測(cè)和微球免疫分析的應(yīng)用技術(shù),可以輕松的在短時(shí)間內(nèi),同時(shí)檢測(cè)多種蛋白,其作用原理利用熒光強(qiáng)度不同的微球,上面帶有可以辨認(rèn)特定蛋白的抗體(captureantibody),與樣本(例如血清、血漿、培養(yǎng)上清液、細(xì)胞裂解液等)及PE檢測(cè)抗體(detectionantibody)作用后,以流式細(xì)胞儀進(jìn)行分析,根據(jù)PE熒光強(qiáng)度的不同用FCAPArray軟件進(jìn)行分析和標(biāo)準(zhǔn)品做比對(duì)后,可進(jìn)行樣本內(nèi)特定,蛋白的定性或定量。CBA具有以下優(yōu)點(diǎn):每次檢測(cè)需25-50ul樣本;靈敏度可達(dá)0.274pg/ml時(shí)間t夬速,需3-4小時(shí),快速上樣可同時(shí)測(cè)定30種蛋白,實(shí)驗(yàn)可重復(fù)性高利用FCAPArray軟件,不論樣本數(shù)目多少,可快速分析完成分析HBEGF

上海樂(lè)備實(shí)生物技術(shù)有限公司是一家有著雄厚實(shí)力背景、信譽(yù)可靠、勵(lì)精圖治、展望未來(lái)、有夢(mèng)想有目標(biāo),有組織有體系的公司,堅(jiān)持于帶領(lǐng)員工在未來(lái)的道路上大放光明,攜手共畫(huà)藍(lán)圖,在上海市等地區(qū)的醫(yī)藥健康行業(yè)中積累了大批忠誠(chéng)的客戶粉絲源,也收獲了良好的用戶口碑,為公司的發(fā)展奠定的良好的行業(yè)基礎(chǔ),也希望未來(lái)公司能成為*****,努力為行業(yè)領(lǐng)域的發(fā)展奉獻(xiàn)出自己的一份力量,我們相信精益求精的工作態(tài)度和不斷的完善創(chuàng)新理念以及自強(qiáng)不息,斗志昂揚(yáng)的的企業(yè)精神將**上海樂(lè)備實(shí)生物供應(yīng)和您一起攜手步入輝煌,共創(chuàng)佳績(jī),一直以來(lái),公司貫徹執(zhí)行科學(xué)管理、創(chuàng)新發(fā)展、誠(chéng)實(shí)守信的方針,員工精誠(chéng)努力,協(xié)同奮取,以品質(zhì)、服務(wù)來(lái)贏得市場(chǎng),我們一直在路上!