流式細(xì)胞術(shù)多色方案

來源: 發(fā)布時間:2022-08-16

基于luminex平臺的xMAP技術(shù):Luminex:應(yīng)用熒光編碼微球帶有針對不同目標(biāo)分子的特異性抗體,不同的微球在一定程度上可以自由組合,這樣在一次實驗中可以同時完成多個目標(biāo)分子的分析。原理:應(yīng)用微球和流式細(xì)胞儀的原理,微球內(nèi)部含有三種免疫熒光,通過熒光不同的比例可以區(qū)分500種不同的微球。每種微球可以用來檢測一種不同的蛋白或基因。因此,利用微球技術(shù),可以同時檢測高達(dá)500個蛋白或基因。特點:1、既能檢測蛋白,又能檢測核酸2、既能用于臨床,又能用于多學(xué)科科研領(lǐng)域3、真正意義的“高通量”檢測,一次檢測100個指標(biāo)4、在準(zhǔn)確度、精確度、靈敏度方面與ELISA均可達(dá)到相似的水平本panel可檢測以下因子:Adiponectin,IL-1β,IL-6,Leptin,MCP-1,PAI-1 (Total),TNFα 種屬:Rat。流式細(xì)胞術(shù)多色方案

多重?zé)晒饷庖呓M化技術(shù)優(yōu)勢1.由于每次體系中都只有單一抗體孵育,因此無需擔(dān)心抗體交叉反應(yīng),以及一抗二抗種屬匹配問題,減少了實驗設(shè)計時不同種屬抗體選擇匹配的限制。2.TSA技術(shù)可以用于檢測用傳統(tǒng)方法無法檢出的低豐度靶標(biāo)?;诶阴0返男盘柗糯蠹夹g(shù)能夠提供極強的敏感度、檢測極微量的目的抗原。極大的降低抗體的用量,節(jié)約抗體,實測確實可以提升抗體的稀釋比例。3.熒光法多重免疫組化,可同時進(jìn)行五個顏色通道以上,這種情況下發(fā)射光譜會重疊,我們可以借助多光譜成像系統(tǒng)來解決這個問題。這是傳統(tǒng)間接熒光法染色和顯色法多重免疫組化所做不到的。這種方法能真實反映關(guān)鍵蛋白的表達(dá)情況和相互之間的關(guān)系,從而極大地節(jié)約珍貴的樣品。多因子檢測與癲癇本panel可檢測以下因子:MIF,PAI-1 (Total),sFas,sFasL,sICAM-1,sVCAM-1 種屬:Human。

LUMINEX常見問題及解答(一)1)LUMINEX應(yīng)用于哪些領(lǐng)域?生物醫(yī)學(xué)研究,生物標(biāo)記物開發(fā),臨床檢測等領(lǐng)域。Luminex技術(shù)主要用于蛋白和核酸檢測分析。2)LUMINEX敏感性如何?靈敏度取決于開頭的質(zhì)量。對于同樣的抗體對,Luminex檢測的靈敏度高于ELISA技術(shù)。一般檢測靈敏度在pg級。3)對不同類型的樣品制備和樣品量的要求是怎樣的?血清、血漿是常用的樣本,每次檢測需要10ul,每次可以檢測多個蛋白。從各種細(xì)胞或組織中提取的蛋白也可以用Luminex技術(shù)檢測,制備方法與ELISA、WesternBlot完全一樣。4)一般可以檢測到多少基因或蛋白的表達(dá)信息?檢測蛋白和基因的數(shù)目主要取決于試劑盒。蛋白質(zhì)檢測目前可以達(dá)到50個左右,基因檢測可達(dá)500個。5)如何保證檢測結(jié)果的特異性?檢測的特異性取決于抗體高特異性。試劑幾乎全部來源于美國大公司,產(chǎn)品經(jīng)過了嚴(yán)格的質(zhì)量控制。同時,我們檢測公司也有近15年的經(jīng)驗、嚴(yán)格的操作程序和質(zhì)量控制體系。

本panel可檢測以下因子:CCL8/MCP-2,Complement Factor D/Adipsin,CXCL1/GRO alpha/KC/CINC-1,CXCL2/GRO beta/MIP-2/CINC-3,EGFR,EMMPRIN/CD147,G-CSF,Granzyme B,Haptoglobin,HGF,IFN-gamma,IGFBP-3,IL-3,IL-4,IL-5,IL-6,IL-12 p70,IL-16,IL-17E/IL-25,IL-6R alpha,LDLR,MMP-8,MMP-9,beta-NGF,Pancreatic Polypeptide/PP,PDGF-AA,Periostin/OSF-2,Podocalyxin,Prolactin,Renin,S100A9,P-Selectin/CD62P,Syndecan-1/CD138,TIM-1/KIM-1/HAVCR,TWEAK/TNFSF12 種屬:Mouse本panel可檢測以下因子:Akt1 (total),Akt1 (Ser473) 種屬:Human,Mouse,Rat。

Luminex液相懸浮芯片是基于高通量微孔板的多重檢測抗體芯片技術(shù)。其基本原理是將高度特異的捕獲單克隆抗體偶聯(lián)到不同熒光標(biāo)記的磁珠上,將不同種類磁珠混合后懸浮于96孔微孔板中。在檢測時,一束激光照射磁珠上的熒光,識別磁珠標(biāo)記的捕獲抗體,從而獲知該磁珠可檢測哪種細(xì)胞因子,從而實現(xiàn)“定性”作用。進(jìn)一步,通過加入生物素標(biāo)記的高親和配對檢測抗體,同步識別磁珠抓取的目標(biāo)細(xì)胞因子,形成“三明治”結(jié)構(gòu),并加入SA-PE偶聯(lián)上生物素,通過另一束激光照射進(jìn)行信號放大檢測,實現(xiàn)“定量”作用。本panel可檢測以下因子:SARS-CoV-2 RBD wild type,SARS-CoV-2 S1 wild type 種屬:Human。轉(zhuǎn)錄因子文庫

LabEx提供 AKT、MAPK、Apoptosis等經(jīng)典信號通路研究。流式細(xì)胞術(shù)多色方案

本panel可檢測以下因子:BCMA/TNFRSF17,Cathepsin S,CD23/Fc epsilon RII,CD44,CEACAM-1/CD66a,Coagulation Factor XIV/Protein C,Complement C2,CX3CL1/Fractalkine,CXCL7/NAP-2,CXCL9/MIG,CXCL14/BRAK,D-dimer,Endocan/ESM-1,Endostatin,FGF-23,Fibronectin,Galectin-9,Gas6,HE4/WFDC2,HGFR/c-MET,HTRA2/Omi,IGFBP-2,IGFBP-rp1/IGFBP-7,IL-27,ITIH4,LRG1,Lumican,Lymphotoxin-alpha/TNF-beta,MICB,Midkine,NCAM-1/CD56,beta-NGF,NT-4,Osteoprotegerin/TNFRSF11B,Park7/DJ-1,PBEF/Visfatin,Pentraxin 3/TSG-14,Procalcitonin,Reg3A,S100A8,SCGF/CLEC11a,Serpin A7/TBG,Serpin C1/Antithrombin-III,Serpin F1/PEDF,Syndecan-4,Tau,uPAR 種屬:Human流式細(xì)胞術(shù)多色方案

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