免疫組化,是應(yīng)用免疫學(xué)基本原理——抗原抗體反應(yīng),即抗原與抗體特異性結(jié)合的原理,通過(guò)化學(xué)反應(yīng)使標(biāo)記抗體的顯色劑(熒光素、酶、金屬離子、同位素)顯色來(lái)確定組織細(xì)胞內(nèi)抗原(多肽和蛋白質(zhì)),對(duì)其進(jìn)行定位、定性及定量的研究,稱為免疫組織化學(xué)技術(shù)(immunohistochemistry)或免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)(immunocytochemistry)。LabEx提供IHC/ICC(免疫組化/免疫熒光)實(shí)驗(yàn)服務(wù),提供樣本細(xì)胞涂片、細(xì)胞爬片、組織冰凍切片、組織石蠟切片;或組織、蠟塊均可。一抗(可幫忙提供,費(fèi)用另計(jì))。本panel可檢測(cè)以下因子:CTACK/CCL27,FGF-21,GnRH,IL-6,Jag1,Leptin,Notch1,TNF-α 種屬:Mouse。液相懸浮芯片與蛋白芯片
LabEx可提供的服務(wù)及優(yōu)勢(shì)(二)LabEx服務(wù)的優(yōu)勢(shì):1、專業(yè)的抗體公司;2、先進(jìn)的實(shí)驗(yàn)儀器平臺(tái);3、可靠、放心的結(jié)果;4、實(shí)惠、親民的價(jià)格;5、認(rèn)真、嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ鲬B(tài)度。Luminex平臺(tái)服務(wù):應(yīng)用微球和流式細(xì)胞儀的原理,微球內(nèi)部含有三種熒光免疫熒光,通過(guò)熒光不同的比例可以區(qū)分500種不同的微球。每種微球可以用來(lái)檢測(cè)一種不同的蛋白或基因。因此利用微球技術(shù),可以同時(shí)檢測(cè)高達(dá)500個(gè)蛋白或基因。MSD(MesoScaleDiscovery):將WesternBlot從16小時(shí)縮短至4.5小時(shí)。針對(duì)550位北美和歐洲的生物醫(yī)藥研究人員的報(bào)告中顯示,基于電化學(xué)發(fā)光技術(shù)的MSD(MesoScaleDiscovery)是較受歡迎的5大免疫分析品牌之一。CBA(CytometricBeadsArray):即細(xì)胞因子微球檢測(cè)技術(shù)。是一種基于流式細(xì)胞檢測(cè)系統(tǒng)的多重蛋白定量檢測(cè)方法,它能夠同時(shí)對(duì)單個(gè)樣品中的多個(gè)指標(biāo)進(jìn)行檢測(cè)。NHP XL Cytokine Luminex Performance Premixed Kit 檢測(cè)服務(wù)本panel可檢測(cè)以下因子:IL-4,IL-10,IL-13,MDC,TARC 種屬:Mouse。
酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)技術(shù)(Elispot)LabEx始終致力于為您的研究需要,提供前沿的多因子技術(shù)平臺(tái),用心服務(wù),現(xiàn)有囊括基因、蛋白、組織、細(xì)胞水平包括PCRArray、ELISA,MSD、Luminex、CBA,抗體芯片、多色流式、mIHC及HALO分析等12個(gè)專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室技術(shù)平臺(tái),助推科研進(jìn)步!隨著酶免疫分析技術(shù)在醫(yī)學(xué)及生物學(xué)領(lǐng)域的較廣的應(yīng)用,使體外檢測(cè)各種細(xì)胞因子和抗體研究有了新的突破。在研究免疫應(yīng)答機(jī)制時(shí),以往人們常用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測(cè)體液中游離的細(xì)胞因子(CK)或抗體,但由于游離的循環(huán)抗體或CK半衰期不同,使之在體液中不斷地被代謝,而不能確切地反應(yīng)體內(nèi)抗體及CK水平。80年代中期等根據(jù)ELISA技術(shù)的基本原理,建立了體外檢測(cè)特異性抗體分泌細(xì)胞和CK分泌細(xì)胞的固相酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)(ELISPOT)技術(shù),因其具有較高的特異性和敏感性,目前正被國(guó)內(nèi)外較廣的應(yīng)用,對(duì)探索自身免疫系統(tǒng)疾病發(fā)病機(jī)制具有重要意義。
Luminex液相懸浮芯片是基于高通量微孔板的多重檢測(cè)抗體芯片技術(shù)。其基本原理是將高度特異的捕獲單克隆抗體偶聯(lián)到不同熒光標(biāo)記的磁珠上,將不同種類磁珠混合后懸浮于96孔微孔板中。在檢測(cè)時(shí),一束激光照射磁珠上的熒光,識(shí)別磁珠標(biāo)記的捕獲抗體,從而獲知該磁珠可檢測(cè)哪種細(xì)胞因子,從而實(shí)現(xiàn)“定性”作用。進(jìn)一步,通過(guò)加入生物素標(biāo)記的高親和配對(duì)檢測(cè)抗體,同步識(shí)別磁珠抓取的目標(biāo)細(xì)胞因子,形成“三明治”結(jié)構(gòu),并加入SA-PE偶聯(lián)上生物素,通過(guò)另一束激光照射進(jìn)行信號(hào)放大檢測(cè),實(shí)現(xiàn)“定量”作用。細(xì)胞因子的檢測(cè)常常被用作各項(xiàng)疾病中預(yù)測(cè)免疫反應(yīng)強(qiáng)度的生物標(biāo)志物。
免疫組化染色呈陰性結(jié)果的原因有哪些?1)、抗體濃度和質(zhì)量問(wèn)題以及抗體來(lái)源選擇錯(cuò)誤。不知抗體是進(jìn)口的還是國(guó)產(chǎn)的工作液,怎么這么高稀釋度也沒(méi)能做出陽(yáng)性結(jié)果?另外,不是抗體濃度越高就越易出現(xiàn)陽(yáng)性結(jié)果,抗原抗體反應(yīng)有前帶和后帶效應(yīng),必須摸索比較好濃度。2)、抗原修復(fù)不全,對(duì)于甲醛固定的組織必須用充分抗原修復(fù)來(lái)打開(kāi)抗原表位,以利于與抗體結(jié)合;建議微波修復(fù)用高火4次*6min試試。有人做過(guò)實(shí)驗(yàn),這是比較好的時(shí)間和次數(shù)。若不行,還可高壓修復(fù)。3)、組織切片本身這種抗原含量低;4)、血清封閉時(shí)間過(guò)長(zhǎng)。5)、DAB孵育時(shí)間過(guò)短。6)、細(xì)胞通透不全,抗體未能充分進(jìn)入胞內(nèi)參與反應(yīng)。7)、開(kāi)始做免疫組化,我建議你一定要首先做個(gè)陽(yáng)性對(duì)照片,排除抗體等外的方法問(wèn)題。本panel可檢測(cè)以下因子:IL-10,IL-13,IL-2,IL-4,IL-5,IL-6,IL-9 種屬:Mouse。液相懸浮芯片與蛋白芯片
本panel可檢測(cè)以下因子:MMP-2,MMP-3,MMP-8 種屬:Mouse。液相懸浮芯片與蛋白芯片
LUMINEX常見(jiàn)問(wèn)題及解答(一)1)LUMINEX應(yīng)用于哪些領(lǐng)域?生物醫(yī)學(xué)研究,生物標(biāo)記物開(kāi)發(fā),臨床檢測(cè)等領(lǐng)域。Luminex技術(shù)主要用于蛋白和核酸檢測(cè)分析。2)LUMINEX敏感性如何?靈敏度取決于開(kāi)頭的質(zhì)量。對(duì)于同樣的抗體對(duì),Luminex檢測(cè)的靈敏度高于ELISA技術(shù)。一般檢測(cè)靈敏度在pg級(jí)。3)對(duì)不同類型的樣品制備和樣品量的要求是怎樣的?血清、血漿是常用的樣本,每次檢測(cè)需要10ul,每次可以檢測(cè)多個(gè)蛋白。從各種細(xì)胞或組織中提取的蛋白也可以用Luminex技術(shù)檢測(cè),制備方法與ELISA、WesternBlot完全一樣。4)一般可以檢測(cè)到多少基因或蛋白的表達(dá)信息?檢測(cè)蛋白和基因的數(shù)目主要取決于試劑盒。蛋白質(zhì)檢測(cè)目前可以達(dá)到50個(gè)左右,基因檢測(cè)可達(dá)500個(gè)。5)如何保證檢測(cè)結(jié)果的特異性?檢測(cè)的特異性取決于抗體高特異性。試劑幾乎全部來(lái)源于美國(guó)大公司,產(chǎn)品經(jīng)過(guò)了嚴(yán)格的質(zhì)量控制。同時(shí),我們檢測(cè)公司也有近15年的經(jīng)驗(yàn)、嚴(yán)格的操作程序和質(zhì)量控制體系。液相懸浮芯片與蛋白芯片
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