腫塊物(瘤類)發(fā)病機制中的細胞因子(內(nèi)源性及相關功能):Il-1(白介素1):腫塊物侵襲和血管生成所必需的IL-6(白介素6):化學誘導的淋巴瘤所需IL-12(白介素12):抑制化學致腫塊物作用IL-15(白介素15):促進自然殺傷T細胞白血病IFN-γ:抑制化學致腫塊物作用;抑制淋巴瘤;Stat1和Rag2抑制腫塊物M-CSF:促進乳腺腫塊物侵襲GM-CSF:抑制淋巴瘤和腫塊物TNF-α:化學誘發(fā)的皮膚腫塊物所需MIF:抑制p53腫塊物抑制功能TGF-β:抑制結腸腫塊物Fas-Fasligand:抑制淋巴瘤發(fā)生LabEx提供 AKT、MAPK、Apoptosis等經(jīng)典信號通路研究。msd生物化學發(fā)光實驗
MSD經(jīng)典10因子推薦:中檢院《CAR-T細胞醫(yī)治產(chǎn)品質量控制檢測研究及非臨床研究考慮要點》中提到,使用MSD技術檢測CAR-T細胞醫(yī)治后樣本中細胞因子表達來評估藥物的安全性和有效性。MSD技術-電化學發(fā)光和點陣技術MESOSCALEDISCOVERY公司的ECL(基于石墨微孔板的電化學發(fā)光免疫分析)技術是基于ELISA基本原理的升級,在板底通電從而激發(fā)標記物SULFO-TAG發(fā)光并由CCDCamera進行信號采集;MSDECL技術提高免疫分析的靈敏度,延伸了線性范圍。MSD通過點陣技術,在96孔石墨電極板里可實現(xiàn)10個指標每孔的檢測,同時實現(xiàn)多個指標定量。MSD技術獨具一格的“六合一”特點:亞fg/ml靈敏度,低背景,多靶點檢測,6個數(shù)量級線性范圍,適用于不同樣本基質(血清/血漿,細胞培養(yǎng)上清,腦脊液,尿液,組織勻漿,細胞裂解液)(人/猴子/小鼠/大鼠),5-25ul微量樣本檢測。LabEx提供V-PLEX人、小鼠、大鼠:炎癥反應、免疫調(diào)節(jié)、TH1/TH2通路重要指標多因子組合檢測限。試劑我們提供;檢測我們來做,助您的時間更有價值!msd電化學發(fā)光的應用LabEx多因子檢測技術--液相懸浮技術。
Luminex液相懸浮芯片是基于高通量微孔板的多重檢測抗體芯片技術。其基本原理是將高度特異的捕獲單克隆抗體偶聯(lián)到不同熒光標記的磁珠上,將不同種類磁珠混合后懸浮于96孔微孔板中。在檢測時,一束激光照射磁珠上的熒光,識別磁珠標記的捕獲抗體,從而獲知該磁珠可檢測哪種細胞因子,從而實現(xiàn)“定性”作用。進一步,通過加入生物素標記的高親和配對檢測抗體,同步識別磁珠抓取的目標細胞因子,形成“三明治”結構,并加入SA-PE偶聯(lián)上生物素,通過另一束激光照射進行信號放大檢測,實現(xiàn)“定量”作用。
Q:樣本處理方案?A:血清:不含抗凝劑的**管**,室溫靜置2小時(避免震動,防止溶血),離心20min(4℃,2000g),取上清,建議再一次離心和取上清,建議分裝后-80℃凍存,避免反復凍存血漿:含抗凝劑(EDTA、肝素,具體采取哪種抗凝劑,參考說明書)的**管**,,離心20min(4℃,2000g),取上清,建議再一次離心和取上清,建議分裝后-80℃凍存,避免反復凍存細胞裂解液:收集細胞,PBS清洗后,離心10min(1000g,4℃),棄去上清,加入適量裂解液(107細胞對應200-300ul裂解液),放置于4℃冰箱(20min),離心10min(3000g,4℃),取上清,建議再一次離心和取上清,測定BCA總蛋白濃度,-80℃保存組織裂解液:適量RIPA裂解液加入組織中(10mg對應100-200ul裂解液),組織破碎器處理組織至勻漿(冰上處理),放置于4℃冰箱(20min),離心10min(3000g,4℃),取上清,建議再一次離心和取上清,測定BCA總蛋白濃度,-80℃保存細胞上清:離心,取上清,建議分裝后-80℃凍存,避免反復凍存電化學發(fā)光,一種在電極表面由電化學引發(fā)的特異性化學發(fā)光反應,是電化學和化學發(fā)光兩個過程的完美結合。
免疫組化,是應用免疫學基本原理——抗原抗體反應,即抗原與抗體特異性結合的原理,通過化學反應使標記抗體的顯色劑(熒光素、酶、金屬離子、同位素)顯色來確定組織細胞內(nèi)抗原(多肽和蛋白質),對其進行定位、定性及定量的研究,稱為免疫組織化學技術(immunohistochemistry)或免疫細胞化學技術(immunocytochemistry)。LabEx提供IHC/ICC(免疫組化/免疫熒光)實驗服務,提供樣本細胞涂片、細胞爬片、組織冰凍切片、組織石蠟切片;或組織、蠟塊均可。一抗(可幫忙提供,費用另計)。LabEx流式染色服務:現(xiàn)可進行流式celesta 12色染色,細胞培養(yǎng)加染色一條龍。luminex檢測細胞因子
LabEx多因子檢測作為高效的檢測手段,被廣泛應用在多種疾病研究中。msd生物化學發(fā)光實驗
酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA)即將已知的抗原或抗體吸附在固相載體表面,使酶標記的抗原抗體反應在固相表面進行的技術?;驹恚核捎每乖c抗體的特異反應將待測物與酶連接,然后通過酶與底物產(chǎn)生顏色反應,用于訂量測定。測定的對象可以是抗體也可以是抗原。測量時,抗原(抗體)先結合在固相載體上,但仍保留其免疫活性,然后加一種抗體(抗原)與酶結合成的偶聯(lián)物(標記物),此偶聯(lián)物仍保留其原免疫活性與酶活性,當偶聯(lián)物與固相載體上的抗原(抗體)反應結合后,再加上酶的相應底物,即起催化水解或氧化還原反應而呈顏色。其所生成的顏色深淺與欲測的抗原(抗體)含量成正比。這種有色產(chǎn)物可用肉眼、光學顯微鏡、電子顯微鏡觀察,也可以用分光光度計(酶標儀)加以測定。其方法簡單,方便迅速,特異性強。msd生物化學發(fā)光實驗
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