流式細(xì)胞儀細(xì)胞凋亡分析

來源: 發(fā)布時(shí)間:2022-10-14

Luminex液相懸浮芯片是基于高通量微孔板的多重檢測(cè)抗體芯片技術(shù)。其基本原理是將高度特異的捕獲單克隆抗體偶聯(lián)到不同熒光標(biāo)記的磁珠上,將不同種類磁珠混合后懸浮于96孔微孔板中。在檢測(cè)時(shí),一束激光照射磁珠上的熒光,識(shí)別磁珠標(biāo)記的捕獲抗體,從而獲知該磁珠可檢測(cè)哪種細(xì)胞因子,從而實(shí)現(xiàn)“定性”作用。進(jìn)一步,通過加入生物素標(biāo)記的高親和配對(duì)檢測(cè)抗體,同步識(shí)別磁珠抓取的目標(biāo)細(xì)胞因子,形成“三明治”結(jié)構(gòu),并加入SA-PE偶聯(lián)上生物素,通過另一束激光照射進(jìn)行信號(hào)放大檢測(cè),實(shí)現(xiàn)“定量”作用。細(xì)胞因子的檢測(cè)常常被用作各項(xiàng)疾病中預(yù)測(cè)免疫反應(yīng)強(qiáng)度的生物標(biāo)志物。流式細(xì)胞儀細(xì)胞凋亡分析

Q:樣本保存要求和保存時(shí)間?A:保存要求:<-20℃保存,-80℃保存更佳,避免反復(fù)凍融,凍融超過兩次的樣本不可使用。保存時(shí)間:越短越好,不超過3個(gè)月為佳Q:什么樣的樣本會(huì)比較容易測(cè)出?A:根據(jù)我們統(tǒng)計(jì)的數(shù)據(jù)來看,并沒有這樣的說法,需要做實(shí)驗(yàn)才可以確認(rèn),并且每個(gè)客戶的樣本模型都是不一樣的,并沒有參考性Q:裂解液有什么要求?A:不含SDS和NP40等離子去垢劑成分的裂解液,比較建議愛必信產(chǎn)品(abs47047636)Q:樣本量需求?A:可登陸試劑盒官方網(wǎng)站查詢,一般在試劑盒詳情頁(yè)面中都有,或直接查看說明書。通常用量在50-200ul。實(shí)驗(yàn)室打包服務(wù)為100ul/孔IL-2Ra elisa kit檢測(cè)服務(wù)樣本兼容度高:可兼容血清/血漿、細(xì)胞上清、細(xì)胞/組織裂解液、腦脊液等多種生物學(xué)體液。

免疫組化染色呈陰性結(jié)果的原因有哪些?1)、抗體濃度和質(zhì)量問題以及抗體來源選擇錯(cuò)誤。不知抗體是進(jìn)口的還是國(guó)產(chǎn)的工作液,怎么這么高稀釋度也沒能做出陽(yáng)性結(jié)果?另外,不是抗體濃度越高就越易出現(xiàn)陽(yáng)性結(jié)果,抗原抗體反應(yīng)有前帶和后帶效應(yīng),必須摸索比較好濃度。2)、抗原修復(fù)不全,對(duì)于甲醛固定的組織必須用充分抗原修復(fù)來打開抗原表位,以利于與抗體結(jié)合;建議微波修復(fù)用高火4次*6min試試。有人做過實(shí)驗(yàn),這是比較好的時(shí)間和次數(shù)。若不行,還可高壓修復(fù)。3)、組織切片本身這種抗原含量低;4)、血清封閉時(shí)間過長(zhǎng)。5)、DAB孵育時(shí)間過短。6)、細(xì)胞通透不全,抗體未能充分進(jìn)入胞內(nèi)參與反應(yīng)。7)、開始做免疫組化,我建議你一定要首先做個(gè)陽(yáng)性對(duì)照片,排除抗體等外的方法問題。

MSD超敏電化學(xué)發(fā)光技術(shù)優(yōu)勢(shì):1)更高靈敏度與更寬的線性范圍MSD靈敏度可達(dá)0.05pg/ml,有效線性范圍達(dá)6log(從亞皮克級(jí)到幾萬皮克),能同時(shí)兼顧高低豐度蛋白的檢測(cè)。2)樣本兼容度高,基質(zhì)效應(yīng)小MSD平臺(tái)由于其獨(dú)特的電化學(xué)發(fā)光原理,可將許多非特異信號(hào)予以排除,受樣本性質(zhì)的影響更小(如粘稠樣本,懸濁顆粒樣本等),因此對(duì)于各類生物學(xué)樣本的兼容度高。目前測(cè)定樣本包括但不限于:血清,血漿,培養(yǎng)上清,細(xì)胞/組織裂解液,腦脊液,尿液,眼睛房水,灌洗液等生物學(xué)樣本。3)節(jié)省樣本用量,可實(shí)現(xiàn)多重檢測(cè)傳統(tǒng)ELISA每孔所需樣本量一般為50-100uloMSD通過點(diǎn)陣技術(shù),為珍稀樣本的研究提供了更多的數(shù)據(jù)。4)實(shí)驗(yàn)流程簡(jiǎn)便、快速、多元化MSD提供了更為便捷快速的實(shí)驗(yàn)流程,通常只需4-5小時(shí)5)信號(hào)穩(wěn)定且不受顯色順序影響MSD由于基于電化學(xué)發(fā)光原理,信號(hào)分子需在電激發(fā)的情況下才能產(chǎn)生信號(hào),因此整個(gè)實(shí)驗(yàn)流程無需避光,每孔激發(fā)與信號(hào)采集時(shí)長(zhǎng)統(tǒng)一,避免了像ELISA底物與終止液加入順序先后所導(dǎo)致的數(shù)據(jù)差異,不受操作人員技術(shù)水平差異的影響。LabEx提供 炎癥因子、趨化因子、生長(zhǎng)因子等高通量高靈敏檢測(cè)。

HALO分析平臺(tái)LabEx始終致力于為您的研究需要,提供前沿的多因子技術(shù)平臺(tái),用心服務(wù),現(xiàn)有囊括基因、蛋白、組織、細(xì)胞水平包括PCRArray、ELISA,MSD、Luminex、CBA,抗體芯片、多色流式、mIHC及HALO分析等12個(gè)專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室技術(shù)平臺(tái),助推科研進(jìn)步!技術(shù)介紹LabEx數(shù)字病理圖像分析平臺(tái),為您提供病理圖像分析的全套解決方案,包括可進(jìn)行高通量、全切片式的組織分析的圖像分析的病理圖像分析平臺(tái)HALO。憑借其易用性和可擴(kuò)展性,在免疫腫塊物學(xué)、腫塊物學(xué)、移植科學(xué)、神經(jīng)科學(xué)、眼科、代謝、呼吸和病理學(xué)等領(lǐng)域有著較廣的應(yīng)用。目前HALO數(shù)字病理圖像分析平臺(tái)用戶遍布于全球的生物制藥公司、醫(yī)療和研究組織。多因子技術(shù)可同時(shí)檢測(cè)多個(gè)樣本的多個(gè)指標(biāo),如通路中多個(gè)相關(guān)蛋白的共檢測(cè)。多因子檢測(cè)優(yōu)寧維

MSD平臺(tái)由于其獨(dú)特的電化學(xué)發(fā)光原理,可將許多非特異信號(hào)予以排除,受樣本性質(zhì)的影響更小。流式細(xì)胞儀細(xì)胞凋亡分析

液相懸浮芯片技術(shù)產(chǎn)品多因子技術(shù)可同時(shí)檢測(cè)多個(gè)樣本的多個(gè)指標(biāo),如通路中多個(gè)相關(guān)蛋白的共檢測(cè)。雖然液相蛋白定量檢測(cè)的技術(shù)很多,但是大多數(shù)的技術(shù)能對(duì)樣本進(jìn)行單一指標(biāo)的檢測(cè),同時(shí)檢測(cè)多個(gè)指標(biāo)時(shí)則需要提供大量的樣本分批檢測(cè),操作繁瑣,且各指標(biāo)間差異性較大。對(duì)于樣本量較少或需要對(duì)比各指標(biāo)的用戶,傳統(tǒng)的技術(shù)無法滿足需要。日常實(shí)驗(yàn)中,常需對(duì)溶液體系中的可溶性蛋白進(jìn)行定量檢測(cè),如細(xì)胞培養(yǎng)上清或血清中的細(xì)胞因子含量的定量分析,由于這些因子的含量較少,低于一般常規(guī)方法的檢測(cè)下限,使用常規(guī)的蛋白檢測(cè)方法如WesternBlot等很難檢測(cè)。而多因子技術(shù)樣本需求量少(25~60μL/孔),檢測(cè)指標(biāo)多,可兼容血清/血漿,細(xì)胞上清,細(xì)胞/組織裂解液,腦脊液等多種生物學(xué)體液。其靈敏度高(部分panel可達(dá)到亞fg/ml),寬線性范圍(達(dá)到6個(gè)log),具有高重復(fù)性(板內(nèi)CV<6-8%,板間<10%,批間<15%),適宜多類型指標(biāo)的同時(shí)測(cè)定(炎癥,趨化,代謝……)。流式細(xì)胞儀細(xì)胞凋亡分析

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