流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞因子的應(yīng)用

Luminex液相芯片檢測(cè)實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)原理：Luminex：應(yīng)用微球和流式細(xì)胞儀的原理，微球內(nèi)部含有三種免疫熒光，通過(guò)熒光不同的比例可以區(qū)分500種不同的微球。每種微球可以用來(lái)檢測(cè)一種不同的蛋白或基因。因此，利用微球技術(shù)，可以同時(shí)檢測(cè)高達(dá)500個(gè)蛋白或基因。Luminex技術(shù)的測(cè)量結(jié)果在準(zhǔn)確度、精確度、靈敏度方面與ELISA均可達(dá)到相似的水平。Luminex應(yīng)用的熒光編碼微球帶有針對(duì)不同目標(biāo)分子的特異性抗體，不同的微球在一定程度上可以自由組合，這樣在一次實(shí)驗(yàn)中可以同時(shí)完成多個(gè)目標(biāo)分子的分析。多目標(biāo)分子的同時(shí)測(cè)定可以減少生物樣品的消耗量，節(jié)省成本和測(cè)定時(shí)間，并且使多種目標(biāo)分子之間相關(guān)性的分析更加準(zhǔn)確。目前，Luminex試劑盒已經(jīng)可以檢測(cè)500多種蛋白質(zhì)分子，包括細(xì)胞因子、自身抗體、腫塊物標(biāo)志物等。LabEx提供酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)檢測(cè)服務(wù)！流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞因子的應(yīng)用

Q：樣本處理方案?A：血清：不含抗凝劑的**管**，室溫靜置2小時(shí)（避免震動(dòng)，防止溶血），離心20min（4℃，2000g），取上清，建議再一次離心和取上清，建議分裝后-80℃凍存，避免反復(fù)凍存血漿：含抗凝劑（EDTA、肝素，具體采取哪種抗凝劑，參考說(shuō)明書(shū)）的**管**，，離心20min（4℃，2000g），取上清，建議再一次離心和取上清，建議分裝后-80℃凍存，避免反復(fù)凍存細(xì)胞裂解液：收集細(xì)胞，PBS清洗后，離心10min（1000g，4℃），棄去上清，加入適量裂解液（107細(xì)胞對(duì)應(yīng)200-300ul裂解液），放置于4℃冰箱（20min），離心10min（3000g，4℃），取上清，建議再一次離心和取上清，測(cè)定BCA總蛋白濃度，-80℃保存組織裂解液：適量RIPA裂解液加入組織中（10mg對(duì)應(yīng)100-200ul裂解液），組織破碎器處理組織至勻漿（冰上處理），放置于4℃冰箱（20min），離心10min（3000g，4℃），取上清，建議再一次離心和取上清，測(cè)定BCA總蛋白濃度，-80℃保存細(xì)胞上清：離心，取上清，建議分裝后-80℃凍存，避免反復(fù)凍存炎癥因子檢測(cè) elisa多因子技術(shù)服務(wù)我們LabEx是專業(yè)！

LabEx可提供的服務(wù)及優(yōu)勢(shì)（一）LabEx服務(wù)的優(yōu)勢(shì)：1、專業(yè)的抗體公司；2、先進(jìn)的實(shí)驗(yàn)儀器平臺(tái)；3、可靠、放心的結(jié)果；4、實(shí)惠、親民的價(jià)格；5、認(rèn)真、嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ鲬B(tài)度。ELISA：將已知的抗原或抗體吸附在固相載體表面，使酶標(biāo)記的抗原抗體反應(yīng)在固相表面進(jìn)行的技術(shù)。該技術(shù)可用于檢測(cè)大分子抗原和特異性抗體等，具有快速、靈敏、簡(jiǎn)便、載體易于標(biāo)準(zhǔn)化等優(yōu)點(diǎn)。流式檢測(cè)服務(wù)：流式細(xì)胞儀是對(duì)細(xì)胞進(jìn)行自動(dòng)分析和分選的裝置，它可以快速測(cè)量、存貯、顯示懸浮在液體中的分散細(xì)胞的一系列重要的生物物理、生物化學(xué)方面的特征參量。并可以根據(jù)預(yù)選的參量范圍把指定的細(xì)胞亞群從中分選出來(lái)?？贵w芯片：具有微型化、集成化、高通量的特點(diǎn)，可以用于檢測(cè)某一特定的生理或病理過(guò)程相關(guān)蛋白的表達(dá)豐度，目前主要用于信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、蛋白組學(xué)、腫塊物及其他疾病的相關(guān)研究。

問(wèn)：因子檢測(cè)技術(shù)有哪些？答:Array抗體芯片、CBA、luminex、MSD。問(wèn)：多因子實(shí)驗(yàn)適用的樣本類型有哪些？答:Serum（血清）、Plasma（血漿）、Cell/Tissuelysate（細(xì)胞/組織裂解液）、CerebrospinalFluid（腦脊液）、BronchoalveolarLavageFluid（支氣管肺泡灌洗液）、NasalLavage（鼻腔灌洗液）Fluid、PeritonealFluid（腹腔液）等等。問(wèn)：如何計(jì)算96孔板可做多少樣本？答:標(biāo)曲16孔，預(yù)實(shí)驗(yàn)8孔，剩余72孔，單孔可做72樣本，復(fù)孔可做36樣本；問(wèn)：多因子實(shí)驗(yàn)的正式實(shí)驗(yàn)，是否可以分批次檢測(cè)？答:可以，但是有如下要注意：（1）CBA：試劑盒須在一個(gè)月內(nèi)用完，否則標(biāo)準(zhǔn)曲線要重做，重做就要用到試劑，那樣本就樣減少。（2）Luminex：每次都必須要做標(biāo)準(zhǔn)曲線，會(huì)浪費(fèi)試劑和孔板，同時(shí)試劑也要在一個(gè)月內(nèi)用完，防止試劑過(guò)期。（3）MSD：每次都必須要做標(biāo)準(zhǔn)曲線，會(huì)浪費(fèi)試劑和孔板，同時(shí)試劑在一個(gè)月內(nèi)用完，防止試劑過(guò)期，每次送樣+標(biāo)準(zhǔn)曲線的數(shù)量，比較好是4的倍數(shù)，否則會(huì)造成浪費(fèi)。MSD平臺(tái)由于其獨(dú)特的電化學(xué)發(fā)光原理，可將許多非特異信號(hào)予以排除，對(duì)于各類生物學(xué)樣本的兼容度高。

多重?zé)晒饷庖呓M化，主要的技術(shù)原理來(lái)自TSA技術(shù)，TSA即酪酰胺信號(hào)放大技術(shù)(Tyramidesignalamplification)，是一類利用辣根過(guò)氧化酶（HRP）對(duì)靶蛋白或核酸進(jìn)行高密度原位標(biāo)記的酶學(xué)檢測(cè)方法。該技術(shù)可與高性能染料AlexaFluor、傳統(tǒng)熒光染料和比色檢測(cè)系統(tǒng)相兼容。簡(jiǎn)單來(lái)說(shuō)，用這種方法做多重免疫熒光是利用二抗上帶有的HRP（而不是直接偶聯(lián)熒光素），來(lái)催化后續(xù)添加入體系的非活性熒光素。熒光素在HRP和過(guò)氧化氫的作用下被活化，跟臨近蛋白的酪氨酸殘基共價(jià)偶聯(lián)，使得蛋白樣品與熒光素穩(wěn)定結(jié)合。然后微波處理，前一輪非共價(jià)結(jié)合的抗體被洗掉，共價(jià)結(jié)合的熒光素還留存在樣品上。再換個(gè)一抗來(lái)第二輪孵育，周而復(fù)始。等到所有抗體孵育結(jié)束，熒光素都結(jié)合好后，然后去檢測(cè)結(jié)果。生物標(biāo)志物開(kāi)發(fā)與研究。生物接觸標(biāo)志物

LabEx提供抗體蛋白質(zhì)芯片,sengenics服務(wù)！流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞因子的應(yīng)用

抗體芯片介紹:ELISA原理的高通量WB，單一樣品多種分析物的檢測(cè)。具有微型化、集成化、高通量的特點(diǎn)，可以用于檢測(cè)某一特定的生理或病理過(guò)程相關(guān)蛋白的表達(dá)豐度，目前主要用于信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、蛋白組學(xué)、腫塊物及其他疾病的相關(guān)研究。R&D的多因子固相抗體芯片?每個(gè)試劑盒可檢測(cè)4個(gè)樣本，每個(gè)樣本可同時(shí)檢測(cè)多達(dá)119個(gè)分析物，實(shí)驗(yàn)可在一日內(nèi)完成?每個(gè)試劑盒提供4張膜，膜上監(jiān)測(cè)點(diǎn)以復(fù)孔的形式包被捕獲抗體和對(duì)照抗體?該即用型試劑盒包含抗體膜，檢測(cè)抗體和緩沖液等所有組分優(yōu)勢(shì)和特點(diǎn)?使用方便，節(jié)省時(shí)間和成本?無(wú)需專門設(shè)備?高通量：1天所得到的數(shù)據(jù)相當(dāng)于免疫印跡幾周所得數(shù)據(jù)?樣本類型多樣化?每種試劑盒均驗(yàn)證過(guò)多種樣本，如細(xì)胞裂解液，組織裂解液，細(xì)胞培養(yǎng)上清，血清，血漿，唾液，尿液或牛奶等?節(jié)省樣本?獲取相同數(shù)據(jù)點(diǎn)所需樣本量遠(yuǎn)低于WB?比競(jìng)爭(zhēng)對(duì)手抗體芯片所需樣本量更少，獲得的數(shù)據(jù)更多LabEx提供28種抗體芯片，用于人，小鼠和大鼠物種的蛋白檢測(cè)相關(guān)服務(wù),我們?yōu)槟峁┩暾膶?shí)驗(yàn)結(jié)果報(bào)告，包括數(shù)據(jù)分析結(jié)果，原始數(shù)據(jù)文件，實(shí)驗(yàn)protocol等。流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞因子的應(yīng)用

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