HamiltonThorne精子分析儀IVOSⅠ與IVOSⅡ一致性比對分析根據(jù)質(zhì)量控制的要求,對新精子分析系統(tǒng)進行性能驗證后,應與舊系統(tǒng)進行一致性評價,從而保證檢測結(jié)果的準確性。方法:選用原有HamiltonThorne精子分析儀IVOSⅠ為參比儀器,新購儀器IVOSⅡ為實驗儀器,對精子分析系統(tǒng)的主要參數(shù)(精子濃度、前向運動精子百分率、總活力)進行分析比對。結(jié)果:兩臺儀器的方法內(nèi)和方法間離群值檢驗、偏倚圖和散點圖的線性關系和離群值檢測所有參數(shù)均能符合比對要求,檢測結(jié)果具有相關性;對實驗儀器的檢測結(jié)果適合范圍的檢驗,當其精子濃度r=0.988,前向運動精子百分率r=0.975,總活力r=0.981,r均≥0.975,表明取值范圍合適;對預期偏倚(Bc)的接受性評價表明當精子濃度在12×10~6/ml,允許總誤差(TEa)為6.67%;當前向運動精子百分率<31%,TEa為2.34%,兩項檢測的Bc上限<1/2允許誤差(Ea),實驗儀器經(jīng)比對分析顯示符合質(zhì)控要求。結(jié)論:通過比對分析,得出兩臺精子分析系統(tǒng)的主要參數(shù)(精子濃度、前向運動精子百分率、總活力)結(jié)果具有可比性,檢測結(jié)果一致,可同時用于臨床標本的檢測。精子分析儀參數(shù),平均路徑速率(VAP)?:精子頭沿其平均路徑移動時的時均速率。慢速運動精子分析DSL
CASA系統(tǒng)也可用于精子形態(tài)學評估。CASA系統(tǒng)可用來定量分析精子頭部形態(tài)學、中段甚至主段的形態(tài),可以把精子頭部和中段分類為正?;蛘卟徽?,還可以給出頭部和中段尺度、頭部橢圓率和勻稱性的均數(shù)、標準差和中位數(shù),以及對染色的精子頂體區(qū)進行測量[3]。與人工操作相比,自動化系統(tǒng)更具客觀性,精確度和重復性的潛力[4]。精確度和重復性不低于7%[5],這優(yōu)于有經(jīng)驗的技術人員的手工評估。兩個研究已經(jīng)提示在CASA結(jié)果與生育力之間存在***聯(lián)系。Coetzee等發(fā)現(xiàn)自動分析的正常精子形態(tài)的結(jié)果是預示體外受精率和妊娠率的有意義指標[6]。Garrett等發(fā)現(xiàn)**中能與透明帶結(jié)合的、具有某些頭部形態(tài)特征的精子所占的百分比(Z%),和直線速度(VSL)的精子的百分比,與大樣本的低生育力夫婦的自然妊娠率是有***且**的關系。Z%和VSL與生育力間的關系顯示是連續(xù)的,而且沒有顯示臨界值;高于臨界值,妊娠率也不會進一步增加[7]。上??焖龠\動精子分析ALHHamilton Thorne精子分析儀是一款功能強大、準確可靠的精子質(zhì)量評估設備。
人類精子冷凍保存和儲存:增加了冷凍樣本的安全性、精液冷凍保存方案、快速液氮熏蒸冷凍、冷凍精液的解凍、玻璃化冷凍等內(nèi)容,更具可操作性。本手冊對人類精子的冷凍保存提出了具體建議:將樣本分管分罐分開儲存;對使用的材料和留存標本建立定期核驗程序;所有儲罐都應有液位監(jiān)控報警系統(tǒng),以監(jiān)測溫度和液氮液位,傳感器應連接警報器,可通過實驗室人員的終端進行提醒。新證據(jù)表明,玻璃化冷凍是冷凍保存精液的一種有價值的方法。該方法的原理是將小體積樣本與無污染液氮直接接觸并快速冷凍,可以防止冰晶的形成,并減少精子的滲透性損傷。在麥管玻璃化冷凍(無菌玻璃化冷凍)中,也可以使用封閉系統(tǒng),不需要無菌的液氮。
精液顯微鏡檢查精子計數(shù):正常人精子計數(shù)為0.6×1012~1.5×0.012/L,相當于一次排出的精子總數(shù)為400×106~600×106。當精子計數(shù)值<20×106/ml或一次排精總數(shù)<100×106為精子減少,超過致孕極限而導致不育。精液直接涂片或離心沉淀后均未查到精子為無精癥。見于先天性睪丸發(fā)育不全、畸形或后天睪丸損傷和萎縮(如睪丸結(jié)核、炎癥、淋病、垂體或腎上腺功能異常的內(nèi)分泌性疾病等)、輸精管阻塞或是先天性輸精管及精囊缺陷,是導致少精或無精的重要原因,也是導致不育的重要原因。檢查有無精子也是檢查輸精管結(jié)扎術的效果觀察。結(jié)扎六周后,連續(xù)檢查無精子,說明手術成功,如果結(jié)扎兩個月后,精液中仍有精子,說明手術不成功。傳統(tǒng)的CASA系統(tǒng)仍使用傳統(tǒng)閾值圖像處理方法,準確率有待提高。
通過結(jié)果的生物學意義對結(jié)果質(zhì)量進行評估?當所有具生物學意義的參數(shù)在測試中表現(xiàn)出較小的可變性時則方法學可變性亦較低方法學可變性低則結(jié)果質(zhì)量就高。CASA系統(tǒng)獲得的數(shù)值與直觀評估獲得的數(shù)值進行分析和比較在精子數(shù)量和綜合運動性上具有較好的相關性而·131·中國優(yōu)生與遺傳雜志2002第10卷第6期DOI:10.13404/j.cnki.cjbhh.2002.06.091在前向運動精子百分率上的相關性較低]。Holt等報道了在常規(guī)實驗條件下采用五種不同的CASA系統(tǒng)對**參數(shù)值進行比較,其結(jié)果為:采用同一個測定池由不同的操作者測定**參數(shù);變異系數(shù)(CV)是29%?活動精子比率的CV為24%?平均路徑速度(VAP)的CV為43?85%。作者們指出該分析結(jié)果不應看作是不同CASA系統(tǒng)間的工作情況的比較?實際上它揭示了操作者的錯誤是差異的主要來源。目前有待于尋找進一步的標準來評估CASA變量的結(jié)果質(zhì)量。精子***的生物學功能是使卵細胞授精?因此用夫婦中的授精結(jié)果來考察精子運動性是合理的?只有在該基礎上能夠確定活動性參數(shù)的重要性。輔助生殖技術(授精IVF)的發(fā)展使檢測精子質(zhì)量與各參數(shù)間的關系的比較成為可能;同樣可以驗證CASA測定結(jié)果與精子真實質(zhì)量間的相關性有利于CASA結(jié)果質(zhì)量的提高。CASA系統(tǒng)用量少,檢測速度快,能夠顯著提高實驗室的工作效率。美國魚精子分析DSL
精子分析儀能分析與精子運動功能相關的各種參數(shù)。慢速運動精子分析DSL
七、精子形態(tài)檢查[正常參考值]畸形精子:<10%-15%;凝集精子:<10%;未成熟精細胞:<1%。[臨床意義]1.精索靜脈曲張病人的畸形精子增多,提示精子在不成熟時已進入精液,或靜脈回流不暢造成陰囊內(nèi)溫度過高和睪丸組織缺氧,或血液帶有毒性代謝產(chǎn)物從腎或腎上腺靜脈逆流至睪丸,上述原因均有損于精子形態(tài)。2.精液中凝集精子增多,提示生殖道***或免疫功能異常。3.睪丸曲細精管生精功能受到藥物或其他因素影響或傷害時,精液中可出現(xiàn)較多病理性未成熟精細胞。八、精液細胞檢查[正常參考值]白細胞(WBC):<5個/HP(高倍鏡視野);紅細胞(RBC):0-偶見/HP。[臨床意義]1.精液中白細胞增多,常見于精囊炎、前列腺炎及結(jié)核等。2.精液中紅細胞增多,常見于精囊結(jié)核、前列腺*等。3.精液中若查到*細胞,對生殖系*有診斷意義。慢速運動精子分析DSL