怎樣避免由于樣品導(dǎo)致的壓力增大?顆粒性物質(zhì)——堵塞濾膜和層析柱○對于濾膜吸附較高的的樣品,體積較小時,可以用離心代替過濾,比如10000g離心15分鐘○細(xì)胞裂解液可50000g離心30分鐘○可以使用醋酸纖維素膜或者PVDF膜,其對蛋白的非特異性吸附較低○選擇合適孔徑的濾器沉淀或者聚體堵塞層析柱○過濾○通過改變pH,加鹽或添加劑穩(wěn)定樣品或減少聚體產(chǎn)生○避免機械壓力和過高的蛋白濃度核酸——過高粘度可能會封閉填料上的配基○加入核酸酶○使用硫酸鏈霉素,聚乙烯亞胺或硫酸魚精蛋白沉淀脂類——可能封閉填料上的配基或堵塞濾膜和層析柱○離心○使用硫酸銨,硫酸葡聚糖或PVP沉淀源景智能,為生物制藥提供純化整體解決方案!莆田中小試玻璃層析柱
操作簡便、易于維護(hù)和清洗操作時只需要將樣品注入層析柱,并通過恰當(dāng)?shù)木彌_液或溶劑,控制樣品在柱內(nèi)流動即可得到分離和純化所需組分。而且,玻璃層析柱的柱體和填料均為可重復(fù)使用,使用后只需進(jìn)行簡單的清洗和消毒即可維護(hù)保養(yǎng)。玻璃層析柱在生物學(xué)、藥學(xué)、化學(xué)等領(lǐng)域有著廣泛的應(yīng)用。在蛋白質(zhì)純化和結(jié)構(gòu)研究中,它被廣泛應(yīng)用于分離不同大小、形狀和電荷的蛋白質(zhì)分子。在天然產(chǎn)物和中藥提取中,它能夠分離和純化其中的活性成分,提高其藥效和生物活性。在化學(xué)合成中,它能夠快速地分離純化反應(yīng)產(chǎn)物并去除雜質(zhì)。山東實驗室玻璃層析柱生產(chǎn)廠家源景智能,層析柱,為實驗提供便利。
層析柱裝填的創(chuàng)新突破在于采用自動原位裝填技術(shù),即在裝填過程中,通過的裝填工作站,重懸介質(zhì)并泵入組裝好的柱內(nèi)。原位裝填有利于介質(zhì)均勻裝填到柱內(nèi),帶來更好的分辨率和產(chǎn)率。它還確保了填充床更穩(wěn)定,從而提高了批次間的一致性。自動原位裝填的另一優(yōu)點是使整個過程更加符合衛(wèi)生要求,因為操作員使用的是全封閉系統(tǒng)。所有裝填和在位清潔工序無需拆卸柱頭,消除了生產(chǎn)過程中的污染風(fēng)險,并且在某些情況下還可防止操作員在處理生物危險性物品時受到傷害。目前,全球有超過70%的新型柱層析操作設(shè)備采用原位裝填系統(tǒng)。
層析柱是一種用于分離和純化混合物中不同成分的實驗裝置。它通常由一個圓柱形的玻璃或塑料柱體組成,內(nèi)部填充有特定的層析介質(zhì),如硅膠、凝膠、離子交換樹脂等。在化學(xué)、生物化學(xué)和分子生物學(xué)等領(lǐng)域中廣泛應(yīng)用。其工作原理基于混合物中各組分在固定相(層析介質(zhì))和流動相(通常是溶劑)之間的分配系數(shù)差異。例如,在蛋白質(zhì)純化過程中,通過選擇合適的層析柱和介質(zhì),可以將目標(biāo)蛋白質(zhì)與其他雜質(zhì)分離開來。又如,在有機化學(xué)中,用于分離不同極性的化合物。層析柱的大小、形狀和填充材料的選擇取決于具體的分離需求和實驗條件。專業(yè)密封技術(shù),層析柱無泄漏風(fēng)險!
柱層析操作時,先在圓柱管中先填充不溶性基質(zhì),形成一個固定相。將樣品加到柱子上,用特殊溶劑洗脫,溶劑組成流動相。在樣品從柱子上洗脫下來的過程中,根據(jù)樣品混合物中各組分在固定相和流動相中分配系數(shù)不同,經(jīng)多次反復(fù)分配將組分分離。層析柱的直徑大小不影響分離度,樣品用量大,可加大柱的直徑,一般制備用凝膠柱,直徑大于2厘米,但在加樣時應(yīng)將樣品均勻分布于凝膠柱床面上。柱層析的上樣也有干法和濕法之分:干法就是把待分離的樣品用少量溶劑溶解后,在加入少量硅膠,拌勻后再旋去溶劑。如此得到的粉末再小心加到柱子的頂層。干法上樣較麻煩,但可以保證樣品層很平整。濕法上樣就是用少量溶劑(比較好就是展開劑,如果展開劑的溶解度不好,則可以用一極性較大的溶劑,但必須少量)將樣品溶解后,再用膠頭滴管轉(zhuǎn)移得到的溶液,沿著層析柱內(nèi)壁均勻加入。然后用少量溶劑洗滌后,再加入。源景智能層析柱,填料均一穩(wěn)定,確保批次間高度一致性!蚌埠實驗室層析柱供應(yīng)商
專業(yè)團隊提供層析柱工藝開發(fā)支持!莆田中小試玻璃層析柱
關(guān)于層析柱的選擇,首先要考慮分離目標(biāo)的性質(zhì)和特點,包括分子大小、極性、電荷等因素。其次,還需要考慮使用的流動相和操作條件,以及設(shè)備的尺寸和形狀等因素。常見的層析柱類型有正相層析、反相層析、離子交換層析、凝膠過濾層析、親和層析等。值得注意的是,在使用層析柱進(jìn)行分離純化時,一定要嚴(yán)格控制操作條件和流量速度,以確保分離效果和純度。此外,為了延長使用壽命,需要對其進(jìn)行正確的維護(hù)和清洗??傊?,層析柱是一種高效、精確分離技術(shù),具有廣泛的應(yīng)用前景和潛力。隨著科技進(jìn)步和需求的增加,相信該柱將在各個領(lǐng)域得到更廣泛的應(yīng)用和發(fā)展。莆田中小試玻璃層析柱