酵母雙雜交表明擬南芥AtBT2蛋白可以與AtRGA互作。與對照相比,擬南芥bt1/2雙突變體幼苗高度降低,而硝酸鹽處理可以進(jìn)一步抑制其生長,外源施加GA可以回復(fù)其生長缺陷。在擬南芥中異源表達(dá)MdBT2可以明顯提高植株高度,而PAC處理則會抑制這種生長的促進(jìn)作用。在擬南芥中異源表達(dá)MdRGL3a可以明顯抑制植株生長,而硝酸鹽處理和MdBT2過表達(dá)則會緩解這種生長抑制作用。外源GA處理可以逆轉(zhuǎn)以上對植株生長的影響(圖A-D)。以上結(jié)果表明,BT蛋白通過DELLA蛋白調(diào)控植株生長,這一機制在不同的植物中具有保守性。酵母文庫篩選做文庫篩選前,首先需要檢測你的誘餌的自***活性和對酵母的毒性。海南歐易生物酵母文庫報價
進(jìn)行了酵母雙雜交篩選實驗,結(jié)果顯示 MdMPK3 可以與 MdWRKY17 相互作用(圖 C),并且通過 BiFC、Co-IP 得以證實(圖 D-E)。MdMPK3 的激酶活性水平在炭疽菌***后也***上升(圖 B)。進(jìn)一步的 BiFC 和 Co-IP 表明,MdMEK4 可以與 MdMPK3 相互作用(圖 F-G)。體外激酶試驗表明,MdWRKY17 能夠被MdMEK4- MdMPK3 級聯(lián)磷酸化(圖 H)。綜上,MdMEK4-MdMPK3 級聯(lián)磷酸化 MdWRKY17。與對照相比,MdWRKY17過表達(dá)植株中水楊酸含量降低,而RNAiMdWRKY17植株中水楊酸含量升高(圖A)。生物技術(shù)酵母文庫價格液態(tài)酵母單雙雜高通量篩庫方法及其應(yīng)用。
酵母文庫實驗由歐易生物完成。6.902)在線發(fā)表了題為“MKK4-MPK3-WRKY17-mediated salicylic acid degradation increases susceptibility to Glomerella leaf spot in apple”的研究論文,報道了一個蘋果炭疽葉枯病易感相關(guān)的轉(zhuǎn)錄因子 MdWRKY17,并對其作用機制進(jìn)行了詳細(xì)探討。蘋果是世界上頗受歡迎的水果。蘋果炭疽葉枯病(Glomerellaleafspot,GLS)在我國多次爆發(fā),是蘋果相當(dāng)有毀滅性的***病害之一,嚴(yán)重影響蘋果質(zhì)量和產(chǎn)量。但目前在蘋果中尚未鑒定出GLS的抗性基因。
進(jìn)行了酵母雙雜交文庫的篩選,結(jié)果顯示鈣依賴的種子特異性蛋白激酶SPK可以與OsNF-YB9相互作用,分段截取互作驗證顯示OsNF-YB9的N端是互作所必須的(圖a-b),并通過雙熒光分子互補實驗、BiFC、體外GST-pulldown實驗得以證實(圖c-e)。亞細(xì)胞定位顯示SPK主要在細(xì)胞質(zhì)中表達(dá),OsNF-YB9在細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核中都有表達(dá),共表達(dá)SPK和OsNF-YB9***促進(jìn)了OsNF-YB9的入核(圖f),表明SPK和OsNF-YB9的相互作用可能促進(jìn)了OsNF-YB9從細(xì)胞質(zhì)向細(xì)胞核的運輸。RT-PCR顯示SPK在發(fā)育中的種子中高表達(dá),在5DAF開始***,并在10-30DAF維持高表達(dá)水平(圖a-b)。spk敲除突變體種子中堊白率的增加(圖c-e),但粒形和粒重與野生型沒有***差別。酵母文庫雙雜交技術(shù)及應(yīng)用。
酵母單雜交測試:為驗證該文庫在Y2H和Y1H體系中的有效性,作者以O(shè)sMADS1為誘餌篩選水稻轉(zhuǎn)錄因子文庫,進(jìn)行了酵母雙雜交測試。以Ghd7的啟動子片段為誘餌,進(jìn)行了酵母單雜交測試。結(jié)果顯示我們的水稻轉(zhuǎn)錄因子文庫可以有效且高通量的檢測蛋白-水稻TF、DNA-水稻TF間的相互作用。另外,該研究中指出,使用該文庫篩選鑒定蛋白-TF互作,采用mating法較為方便,即Y2HGold-Bait誘餌菌液與Y187-TF文庫菌液一對一雜交。而篩選鑒定DNA-TF互作,采用Y1HGold系統(tǒng),即Y1HGold-pomoter篩選TF文庫質(zhì)粒更簡單高效。此外,可通過降低篩選壓力處理,進(jìn)行弱相互作用的檢測。酵母單雜篩庫酵母文庫篩選酵母雙雜交篩庫步驟。湖南歐易生物酵母文庫報價
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酵母雙雜交文庫:本研究通過藍(lán)/紅光誘導(dǎo)青蒿中青蒿素生物合成基因的表達(dá),使用轉(zhuǎn)錄組分析確定了一個WRKY轉(zhuǎn)錄因子AaWRKY9,可明顯***青蒿素生物合成相關(guān)基因的表達(dá)。實驗表明AaWRKY9通過光依賴JA信號通路調(diào)節(jié),在青蒿素生物合成中發(fā)揮重要作用,AaWRKY9通過與AaDBR2和AaGSW1的啟動子結(jié)合正向調(diào)節(jié)青蒿素的積累。此外,JA信號通路中的抑制因子AaJAZ9與AaWRKY9相互作用,并抑制其轉(zhuǎn)錄***活性,而在MeJA存在情況下,AaJAZ9被降解,AaWRKY9的轉(zhuǎn)錄***活性增加,進(jìn)而促進(jìn)青蒿素生物合成基因的表達(dá)。酵母雙雜交文庫結(jié)果表明,AaWRKY9有助于光和JA信號調(diào)節(jié)青蒿素的生物合成,為兩種信號途徑在植物次生代謝物合成中的整合調(diào)控提供了新見解。海南歐易生物酵母文庫報價
上海歐易生物醫(yī)學(xué)科技有限公司坐落在聯(lián)航路1188號25幢,是一家專業(yè)的檢驗檢測服務(wù)。(依法須經(jīng)批準(zhǔn)的項目,經(jīng)相關(guān)部門批準(zhǔn)后方可開展經(jīng)營活動,具體經(jīng)營項目以相關(guān)部門批準(zhǔn)文件或許可證件為準(zhǔn))一般項目:生物醫(yī)藥產(chǎn)品、生化產(chǎn)品的研發(fā),醫(yī)藥中間體、化工原料及產(chǎn)品(除危險品化學(xué)品、監(jiān)控化學(xué)品、易制毒化學(xué)品)的研發(fā)、銷售,儀器儀表的銷售,并提供相關(guān)技術(shù)咨詢、技術(shù)服務(wù),會務(wù)服務(wù),企業(yè)管理咨詢。公司。公司目前擁有專業(yè)的技術(shù)員工,為員工提供廣闊的發(fā)展平臺與成長空間,為客戶提供高質(zhì)的產(chǎn)品服務(wù),深受員工與客戶好評。公司以誠信為本,業(yè)務(wù)領(lǐng)域涵蓋科研服務(wù),科研檢測,學(xué)術(shù)研究,技術(shù)咨詢,我們本著對客戶負(fù)責(zé),對員工負(fù)責(zé),更是對公司發(fā)展負(fù)責(zé)的態(tài)度,爭取做到讓每位客戶滿意。公司深耕科研服務(wù),科研檢測,學(xué)術(shù)研究,技術(shù)咨詢,正積蓄著更大的能量,向更廣闊的空間、更寬泛的領(lǐng)域拓展。