2016年發(fā)表的DR-seq和G&T-seq技術(shù),實現(xiàn)在單細胞內(nèi)同時進行基因組和轉(zhuǎn)錄組的測序分析,使得研究人員能夠在分析細胞間基因組差異和基因表達異質(zhì)性的同時,進一步理解基因組序列差異、拷貝數(shù)變異與轉(zhuǎn)錄組異質(zhì)性之間的關(guān)系.隨后在同一個單細胞內(nèi),基于轉(zhuǎn)錄組、染色質(zhì)可及性、染色質(zhì)構(gòu)象、DNA拷貝數(shù)、DNA甲基化、蛋白質(zhì)豐度或者空間狀態(tài)等整合分析的多組學(xué)方法也相繼出現(xiàn)。相較于利用不同的單細胞單組學(xué)測序方法從一類細胞中分別獲取轉(zhuǎn)錄組、基因組、表觀遺傳組等進行分析,單細胞多組學(xué)測序技術(shù)可以從同一個單細胞中同時獲取多種組學(xué)數(shù)據(jù),可以更好地反映細胞在特定狀態(tài)下各組學(xué)間的關(guān)聯(lián)以及復(fù)雜的分子調(diào)控網(wǎng)絡(luò)。單細胞多組學(xué)可從整體層面快速有效地探尋疾病發(fā)生、發(fā)展的根本原因或藥物作用靶點等信息。濟南single cell RNA單細胞多組學(xué)技術(shù)支持
二代測序技術(shù)在測序方法上取得了重大突破，基于“邊合成邊測序”（sequencingbysynthesis）和大規(guī)模平行測序技術(shù)（massiveparallelanalysis,MPS），使測序通量和讀取速度得到極大提升，烈冰生物斥巨資購置的Novaseq6000測序儀的測序原理可以簡化為四步：樣品文庫構(gòu)建、簇生成、測序和數(shù)據(jù)分析。由于讀長限制，樣品DNA或由RNA逆轉(zhuǎn)錄得到的cDNA需要被打斷成300-500bp的片段，并在3和5端接上3種序列：1）Index，用于區(qū)分樣品來源；2）Adapter，用于結(jié)合測序通道上的位點；3）Primerbindingsite，用于結(jié)合PCR引物啟動擴增反應(yīng)。蘇州烈冰生物單細胞多組學(xué)技術(shù)支持烈冰測序服務(wù)已助力300余篇國際主流期刊研究文章發(fā)表。
隨著單細胞轉(zhuǎn)錄組測序技術(shù)（scRNA-Seq）的蓬勃發(fā)展，其在在胚胎發(fā)育，腫瘤細胞異質(zhì)性，免疫細胞轉(zhuǎn)化等多方面屢建奇功，但是由于細胞形態(tài)的不同和單細胞制備中細胞敏感性的差異等因素影響，scRNA-Seq在數(shù)據(jù)分析時可能會出現(xiàn)細胞類型占比失真，個別細胞類型丟失等情況。為了克服單細胞測序技術(shù)的局限性，單細胞核轉(zhuǎn)錄組測序技術(shù)（snRNA-Seq）應(yīng)運而生，snRNA-Seq可利用凍存組織直接制備單細胞核進行轉(zhuǎn)錄組測序，不僅克服了細胞形態(tài)差異致使的細胞捕獲差異，還克服了單細胞測序必須使用新鮮樣本的多個局限性。
單細胞測序是指針對單個細胞進行全轉(zhuǎn)錄組測序分析，可精確地描述每一個細胞的狀態(tài)，在異質(zhì)性發(fā)育過程中具有不可忽視的應(yīng)用價值。然而，單細胞測序無法給出固態(tài)異質(zhì)化組織中細胞空間排布信息，對于揭示發(fā)育過程、病理微環(huán)境都存在很大的局限性?？臻g轉(zhuǎn)錄組測序以點陣形式記錄病理切片細胞的空間信息并進行測序，可以精確指示點陣內(nèi)的全部基因表達情況?？臻g轉(zhuǎn)錄組測序的加入，無疑讓單細胞測序如虎添翼，更精確地勾勒了組織水平的異質(zhì)性。單細胞多組學(xué) 測序技術(shù)會轉(zhuǎn)向研發(fā)多組學(xué)測序分析和功能驗證同時 進行的方法。
單細胞多組學(xué)測序技術(shù)的發(fā)展依賴于各種單一組學(xué)檢測技術(shù)的完善,但即使在單細胞測序技術(shù)迅速發(fā)展的情況下,在單細胞水平協(xié)同檢測多個不同的分子層面仍然非常具有挑戰(zhàn)性.每一種組學(xué)都有不同的特性和測量方法,這些方法在敏感性、特異性、通量和適用性上都有所不同.因此,在單細胞水平對多種組學(xué)方法進行整合和應(yīng)用時,需要在策略上做出改進,以保證各組學(xué)間的上游建庫以及下游生物信息分析均能良好地兼容,同時也要明確技術(shù)的局限性及其對研究結(jié)果的潛在影響。單細胞多組學(xué)測序技術(shù)整合了單細胞各個組學(xué)特征, 提供了揭示細胞內(nèi)復(fù)雜分子調(diào)控網(wǎng)絡(luò)及其互動關(guān)系的機會。杭州高通量測序單細胞多組學(xué)多組學(xué)測序
在單細胞轉(zhuǎn)錄組領(lǐng)域，將轉(zhuǎn)錄組與蛋白質(zhì)結(jié)合的代表性例子只有單細 胞RＮＡ測序方法。濟南single cell RNA單細胞多組學(xué)技術(shù)支持
高通量測序技術(shù)（High-throughputsequencing）又稱“下一代”測序技術(shù)（“Next-generation”sequencing），以能一次并行對幾十萬到幾百萬條DNA分子進行序列測定和一般讀長較短等為標志。高通量測序技術(shù)是對傳統(tǒng)測序一次顛覆性的改變，一次對幾十萬到幾百萬條DNA分子進行序列測定，因此在有些文獻中稱其為下一代測序技術(shù)(nextgenerationsequencing)足見其劃時代的改變，同時高通量測序使得對一個物種的轉(zhuǎn)錄組和基因組進行細致全貌的分析成為可能，所以又被稱為深度測序(deepsequencing)。而烈冰科技具有專業(yè)生物背景和十二年科研服務(wù)經(jīng)驗，已助力Nature，immunity等在內(nèi)的300+篇CNS文章發(fā)表。濟南single cell RNA單細胞多組學(xué)技術(shù)支持
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