北京牛精子分析LIN

美國HamiltonThorne的TOXIVOS精子分析儀已經(jīng)被FDA和國內(nèi)外毒理學實驗室所使用。本試驗研究目的對精子分析儀和血細胞計數(shù)板在大鼠附睪精子計數(shù)結果的比較驗證。方法選取三批次雄性SD大鼠60只,每批20只,對三批次雄鼠的精子計數(shù)進行比較。健康雄鼠通過戊巴比妥鈉麻醉實施安樂死后,取左側(cè)附睪尾稱重,將附睪尾部放入37℃預熱的含有M199培養(yǎng)液平皿中,剪碎附睪尾,放入培養(yǎng)箱中37℃孵育5min,然后吸取1份精子懸液,用M199培養(yǎng)液進行一定倍數(shù)的稀釋,混勻后,取1滴稀釋液,滴入精子分析儀**載玻片上,將載玻片放入TOXIVOS精子分析儀載物臺,進行精子計數(shù),同時吸取稀釋后的精子懸液滴入血細胞計數(shù)板內(nèi),通過光學顯微鏡進行計數(shù),比較兩種計數(shù)方法的差異性。結果***批次雄鼠精子分析儀和血細胞計數(shù)器的精子計數(shù)結果分別為70.2±33.2,61.0±27.1;第二批次雄鼠精子分析儀和血細胞計數(shù)器的精子計數(shù)結果分別為128.8±116.8,114.6±86.9;第三批次雄鼠精子分析儀和血細胞計數(shù)器的精子計數(shù)結果分別為165.9±91.7,140.0±59.6。三個批次的精子分析儀和血細胞計數(shù)板的精子計數(shù)結果無統(tǒng)計學差異(P>0.05)。結論精子分析儀是一種方便、可靠、快速、高效的研究工具,在生殖毒理學研究中具有重要的應用價值。選擇合適的CASA檢測原理和設備，確保幀率要求，避免因設備問題影響檢測結果?。北京牛精子分析LIN

CASA系統(tǒng)在男性生殖能力檢驗應用中的功能要求和參數(shù)設置CASA是將現(xiàn)代化的計算機技術和先進的圖象處理技術應用于精子質(zhì)量的臨床檢驗，通過對精子動（靜）態(tài)圖象中精子特性的***分析，為臨床提供有關精子質(zhì)量各項指標的準確數(shù)據(jù)。CASA系統(tǒng)一般包括硬件和計算機軟件支持系統(tǒng)幾個部分：（1）相差顯微鏡、恒溫裝置和**技術板（Makler板、Macro板或MicroCell計數(shù)池等）；（2）高速、高分辨率的攝像機和電視監(jiān)視器組成的攝像系統(tǒng)；（3）計算機分析處理系統(tǒng)及打印機打印輸出。計數(shù)精子分析頻閃光源男性精液檢測主要依賴計算機輔助精子分析儀(computer assistant semen analyses，CASA)。

精液顯微鏡檢查精子計數(shù)：正常人精子計數(shù)為0．6×1012～1．5×0.012/L，相當于一次排出的精子總數(shù)為400×106～600×106。當精子計數(shù)值＜20×106/ml或一次排精總數(shù)＜100×106為精子減少，超過致孕極限而導致不育。精液直接涂片或離心沉淀后均未查到精子為無精癥。見于先天性睪丸發(fā)育不全、畸形或后天睪丸損傷和萎縮(如睪丸結核、炎癥、淋病、垂體或腎上腺功能異常的內(nèi)分泌性疾病等)、輸精管阻塞或是先天性輸精管及精囊缺陷，是導致少精或無精的重要原因，也是導致不育的重要原因。檢查有無精子也是檢查輸精管結扎術的效果觀察。結扎六周后，連續(xù)檢查無精子，說明手術成功，如果結扎兩個月后，精液中仍有精子，說明手術不成功。

**分析是判斷男性生育能力的**基本和**重要的常規(guī)檢測方法。目前我國醫(yī)學實驗室普遍使用人工方法進行分析，結果缺少準確性、客觀性和可比性。雖然WHO于近幾年多次修改并推薦**常規(guī)分析的標準方法，但仍不能充分克服人為主觀因素的影響。特別是對精子的活率和活力的分級主要依賴檢驗者的經(jīng)驗和主觀判斷，不同的技術人員分析的結果有時相差甚遠，對精子運動能力的判斷缺少嚴格的量化指標。因此應用一種統(tǒng)一、標準和快速的檢測方法替代人工方法十分必要。計算機計算機輔助**分析系統(tǒng)在**質(zhì)量檢測中的應用49中國衛(wèi)生信息管理雜志第8卷第6期輔助精子分析（Computer-aidedSpermAnalysis,CASA）系統(tǒng)逐步取代了人工操作，在男性不育癥臨床診治及科研中CASA技術彌補了人工方法進行**分析的不足。IVOS和CEROS集成了智能化的分析軟件，能夠自動識別和計算精子的各項參數(shù)，減少了人工操作的誤差。

精子計數(shù)是在顯微鏡下計算一次排出的精液中精子的數(shù)量將精子計數(shù)值乘以精液量就可得出一次**的量。精液液化后將樣本按一定比例稀釋和固定后，滴于血細胞計數(shù)板上，在顯微鏡下計數(shù)紅細胞計數(shù)區(qū)內(nèi)的所有精子數(shù)并換算為每m1內(nèi)所含精子數(shù)。此外還可用電子細胞計數(shù)儀經(jīng)調(diào)整閾值設置后計數(shù)精子數(shù)量。將已經(jīng)液化的精液標本均勻混合，用白細胞計數(shù)吸管吸精液至0.5刻度，再吸稀釋液至11刻度，振蕩三分鐘，然后置于血球計數(shù)板內(nèi)，計數(shù)二大格（每格面積1平方毫米）之精子數(shù)，在尾數(shù)后加5個“0”即得每毫升精液內(nèi)精子數(shù)。例如計數(shù)為1280個，則每毫升精子應為128,000,000。精液稀釋液之配制：重碳酸鈉5克、福爾馬林1毫升、蒸餾水加至100毫升。稀釋液內(nèi)重碳酸鈉有消化粘液的作用，福爾馬林有使精子制動的作用。如精液之稠度過高而不易吸取時，可以精液1毫升混勻于稀釋液19毫升內(nèi)，稀釋后進行計數(shù)。如精子的數(shù)目極少，亦可改為稀釋10倍計數(shù)。每次排精75%的精子是從附睪尾部所貯存的，還有25%是由輸精管道的其他部分來的，因此單憑一次排精的精子計數(shù)來衡量睪丸生精機能是不***的。只有在排精后間隔4-5天以后多次精液檢查，才能比較正確地從這些精子計數(shù)來反映睪丸的生精機能。精子分析，直線速率（VSL）?：精子頭在開始檢測時的位置與終止所處位置之間的直線運動的時均速率。香港水生動物精子分析ALH

HAMILTON THORNE精子分析儀可分析參數(shù)，擺動性（WOB）?：實際的曲線路徑關于平均路徑的擺動值。北京牛精子分析LIN

前沿性檢查：目前不作為生育力低下男性初步評估的常規(guī)方法。這一部分包括了非常專業(yè)化的、主要用于研究的方法和其他新興檢測技術。有研究認為，氧化應激可能是影響人類精子功能和妊娠結局的重要因素；新的證據(jù)也表明了精子DNA完整性和染色質(zhì)組裝與生育力的關系。前沿性檢查一節(jié)中詳細介紹了精子氧化應激和活性氧實驗、精子染色質(zhì)檢測(苯胺藍和色霉素A3染色)的具體實驗操作及討論。手冊重寫了計算機輔助精子分析(CASA)部分，強調(diào)了CASA對于檢測精子濃度的局限性與質(zhì)控要求，增加了CASA檢測精子超活化運動的內(nèi)容。對精子跨膜離子流和轉(zhuǎn)運的功能分析，可更好地了解男性不育因素和男性生殖***疾病。為此，手冊新增了檢測精子跨膜離子流和轉(zhuǎn)運的內(nèi)容。北京牛精子分析LIN