斑馬魚(yú)體長(zhǎng)只有3厘米,1升水里可以包容上百條、養(yǎng)殖起來(lái)很簡(jiǎn)單。此外,斑馬魚(yú)很簡(jiǎn)單鑒別男女并且它的胚胎是透明的,人們可以清楚地看到它的內(nèi)臟、血管和神經(jīng)的發(fā)育變化。正是因?yàn)檫@些特色,斑馬魚(yú)引起了美國(guó)俄勒岡大學(xué)聞名遺傳學(xué)家喬治博士的留意,這位熱帶魚(yú)愛(ài)好者在20世紀(jì)70時(shí)代初開(kāi)始研討斑馬魚(yú)的養(yǎng)殖辦法,觀察其胚胎發(fā)育進(jìn)程。經(jīng)過(guò)近十年的研討,喬治博士的研討組于1981年發(fā)表了一篇具有深刻影響的論文。在這篇論文中,他們介紹了斑馬魚(yú)的體外受精等許多新技術(shù),接著又介紹了斑馬魚(yú)的卵裂特色、不同時(shí)期胚胎中細(xì)胞的發(fā)育進(jìn)程等,并發(fā)現(xiàn)斑馬魚(yú)腦中的許多神經(jīng)元的擺放簡(jiǎn)單而有規(guī)矩。斑馬魚(yú)耳石發(fā)育研究,為人類(lèi)聽(tīng)力損傷機(jī)制提供重要參考。斑馬魚(yú)飼養(yǎng)設(shè)備廠家
斑馬魚(yú)(zebrafish)是一種用于生物學(xué)研究的模式生物。它們?cè)诙喾N方面都被用于研究,包含發(fā)育、遺傳、生理和行為等。其間一個(gè)常用的研究辦法是運(yùn)用多孔板試驗(yàn),它可以用來(lái)測(cè)驗(yàn)斑馬魚(yú)幼魚(yú)的行為和認(rèn)知才能。多孔板試驗(yàn)是一種基于水迷宮的試驗(yàn),通常由一個(gè)容器、一個(gè)多孔板和一些食物組成。試驗(yàn)的過(guò)程中,斑馬魚(yú)幼魚(yú)被放置在容器中,并被要求經(jīng)過(guò)多孔板來(lái)取得食物獎(jiǎng)賞。試驗(yàn)的目的是測(cè)驗(yàn)斑馬魚(yú)幼魚(yú)的學(xué)習(xí)和記憶才能,以及其對(duì)環(huán)境的認(rèn)知才能。斑馬魚(yú)做實(shí)驗(yàn)動(dòng)物斑馬魚(yú)實(shí)驗(yàn)遵循 3R 原則,優(yōu)化實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)減少動(dòng)物使用數(shù)量。
【試驗(yàn)方案】咱們將受測(cè)試斑馬魚(yú)分成兩組,分別是正常對(duì)照組和供試品組(供試品通過(guò)溶解到養(yǎng)魚(yú)用水中攝入到斑馬魚(yú)體內(nèi))。皮膚吸收供試品一段時(shí)間后,咱們通過(guò)中性粒轉(zhuǎn)基因熒光斑馬魚(yú),調(diào)查皮膚/肌肉刺激性;通過(guò)表型拍照,調(diào)查肌肉紋理及皮膚色素變化;通過(guò)AO染色凋亡細(xì)胞,調(diào)查皮膚細(xì)胞凋亡情況?!驹u(píng)價(jià)結(jié)論】1.通過(guò)每組30尾斑馬魚(yú)的比照試驗(yàn),供試品組的斑馬魚(yú)皮膚肌肉發(fā)生顯著的毒性表型(包括肌肉紋理反常和色素反常),在斑馬魚(yú)尾部可見(jiàn)顯著的凋亡細(xì)胞,在軀干部可見(jiàn)顯著的中性粒細(xì)胞合集。2.本試驗(yàn)證實(shí)了該供試品對(duì)斑馬魚(yú)有皮膚肌肉毒性。
【試驗(yàn)計(jì)劃】咱們將受測(cè)試斑馬魚(yú)分成兩組,分別是正常對(duì)照和服用/打針供試品組(供試品經(jīng)過(guò)溶解到養(yǎng)魚(yú)用水中或打針的方法攝入到斑馬魚(yú)體內(nèi))。服用/打針?biāo)幬镆欢螘r(shí)間后,檢測(cè)尾長(zhǎng)、彗星長(zhǎng)、尾矩和Olive尾矩。能夠看到,服用/打針供試品組斑馬魚(yú)細(xì)胞核呈現(xiàn)拖尾。該供試品改變DNA鏈的負(fù)超螺旋結(jié)構(gòu)、空間構(gòu)象,使DNA鏈斷裂、形成類(lèi)核,終究導(dǎo)致細(xì)胞逝世(壞死、凋亡或自體吞噬)?!军c(diǎn)評(píng)結(jié)論】1.經(jīng)過(guò)每組30尾斑馬魚(yú)的比照試驗(yàn),服用/打針供試品組的斑馬魚(yú)細(xì)胞核呈現(xiàn)顯著拖尾,與正常對(duì)照組存在顯著的差別。2.本試驗(yàn)證明了該供試品對(duì)斑馬魚(yú)有基因毒性。胚胎顯微注射技術(shù)可向斑馬魚(yú)導(dǎo)入外源基因,開(kāi)展基因功能研究。
社交對(duì)魚(yú)進(jìn)行交際測(cè)試所需的測(cè)試設(shè)備首要包括一個(gè)通明的Plexiglas十字槽(50×50×10cm,長(zhǎng)×寬×高)(圖3e)。水槽的每只臂都被一個(gè)Plexiglas墻隔開(kāi)。在水槽中,隨機(jī)挑選的一個(gè)末端腔室(其他三個(gè)腔室是空位)和中心腔室各包含一個(gè)相同處理的個(gè)體。轉(zhuǎn)移后,對(duì)魚(yú)進(jìn)行2分鐘的習(xí)慣,記錄其行為8分鐘。數(shù)據(jù)剖析中,計(jì)算出魚(yú)在其同伴(交際圈)鄰近區(qū)域的時(shí)刻,作為對(duì)同種視覺(jué)影響的呼應(yīng)。習(xí)慣漆黑或噪音影響:open-fieldtank被用來(lái)評(píng)價(jià)魚(yú)對(duì)漆黑或噪音影響的驚嚇?lè)磻?yīng)。漆黑和噪聲影響實(shí)驗(yàn)別離進(jìn)行。簡(jiǎn)略地說(shuō),連續(xù)的漆黑影響(5分鐘周期)通過(guò)放置在通明敞開(kāi)設(shè)備底部的多個(gè)主動(dòng)開(kāi)/關(guān)白色LEDs陣列來(lái)傳遞。此外,用一個(gè)塑料立方體(15×9×0.5cm,長(zhǎng)×寬×高)將其提升到100cm的高度,用手將其釋放到堅(jiān)固的平面上,發(fā)生一系列的噪聲影響(圖5a、b)。用了一個(gè)俯視圖照相機(jī)來(lái)捕捉魚(yú)的動(dòng)作。斑馬魚(yú)實(shí)驗(yàn)在中藥抗ancer研究中發(fā)揮重要作用,幫助篩選新的醫(yī)療靶點(diǎn)和潛在醫(yī)療藥物。斑馬魚(yú)魚(yú)房培訓(xùn)
斑馬魚(yú)幼魚(yú)孔板實(shí)驗(yàn)需嚴(yán)格控制溫度、光照及水質(zhì),確保實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)準(zhǔn)確可靠。斑馬魚(yú)飼養(yǎng)設(shè)備廠家
斑馬魚(yú)胚胎的透明性與體外受精特性,使其成為發(fā)育生物學(xué)領(lǐng)域的“活的人體顯微鏡”。德國(guó)馬普研究所團(tuán)隊(duì)通過(guò)單細(xì)胞測(cè)序技術(shù),繪制出斑馬魚(yú)胚胎從受精卵到原腸胚期的細(xì)胞命運(yùn)圖譜,揭示了中胚層細(xì)胞在背腹軸形成中的動(dòng)態(tài)遷移規(guī)律。研究顯示,特定轉(zhuǎn)錄因子(如Tbx16)通過(guò)調(diào)控細(xì)胞黏附分子表達(dá),引導(dǎo)中胚層前體細(xì)胞向預(yù)定區(qū)域聚集,該機(jī)制與小鼠胚胎發(fā)育具有保守性,但斑馬魚(yú)胚胎因缺乏胎盤(pán)屏障,其細(xì)胞遷移速度較哺乳動(dòng)物快到3-5倍。在基因編輯技術(shù)賦能下,斑馬魚(yú)成為研究organ發(fā)生的理想模型。哈佛大學(xué)團(tuán)隊(duì)利用CRISPR-Cas9技術(shù),在斑馬魚(yú)胚胎中同時(shí)敲除多個(gè)心臟發(fā)育相關(guān)基因(如gata4、nkx2.5),發(fā)現(xiàn)其心臟原基在原腸運(yùn)動(dòng)階段即出現(xiàn)融合缺陷,較傳統(tǒng)小鼠模型提前48小時(shí)暴露表型。更突破性的是,通過(guò)光遺傳學(xué)工具調(diào)控特定神經(jīng)嵴細(xì)胞活性,可實(shí)時(shí)觀察心臟瓣膜發(fā)育過(guò)程中細(xì)胞命運(yùn)的可塑性,揭示了心臟畸形中“基因-細(xì)胞-組織”的多級(jí)調(diào)控網(wǎng)絡(luò)。這些發(fā)現(xiàn)為先天性心臟病早期干預(yù)提供了新的分子靶點(diǎn)。斑馬魚(yú)飼養(yǎng)設(shè)備廠家