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Probe qPCR Mix (2×, Low ROX):高特異性與低背景校正的qPCR解決方案Probe qPCR Mix (2×, Low ROX) 是一種為探針法實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qPCR)設(shè)計(jì)的即用型預(yù)混液,適用于需要低濃度ROX校正染料的qPCR儀器。該預(yù)混液結(jié)合了熱啟動(dòng)Taq DNA聚合酶、優(yōu)化的反應(yīng)緩沖液、dNTPs以及低濃度ROX,能夠?qū)崿F(xiàn)高效、特異的基因定量檢測(cè)。產(chǎn)品特點(diǎn)高特異性和靈敏度:采用抗體修飾的熱啟動(dòng)Taq DNA聚合酶,有效減少非特異性擴(kuò)增,提高檢測(cè)靈敏度。低濃度ROX校正:適用于需要低濃度ROX作為校正染料的qPCR儀器,如ABI 7500、ViiA 7、QuantStudio系列等。防污染系統(tǒng):部分產(chǎn)品含有dUTP和UNG(尿嘧啶DNA糖基化酶),能夠有效降解含尿嘧啶的PCR產(chǎn)物,防止假陽性。快速反應(yīng):支持快速qPCR程序,可在短時(shí)間內(nèi)完成檢測(cè),提高實(shí)驗(yàn)效率。操作簡(jiǎn)便:2×預(yù)混液設(shè)計(jì),只需加入引物、探針和模板即可進(jìn)行反應(yīng),減少了操作步驟和污染風(fēng)險(xiǎn)。應(yīng)用場(chǎng)景基因表達(dá)分析:用于定量檢測(cè)特定基因的表達(dá)水平。病原體檢測(cè):快速檢測(cè)病毒、細(xì)菌等病原體的DNA。SNP分型和拷貝數(shù)變異分析:通過探針法實(shí)現(xiàn)高特異性的基因分型。多重qPCR:可在同一反應(yīng)中同時(shí)檢測(cè)多個(gè)目標(biāo)基因??梢岳矛F(xiàn)有的計(jì)算工具,如CRISPR design tools,預(yù)測(cè)gRNA的活性和特異性,以輔助實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì) 。Recombinant Human FLT3/Flk-2(His-Avi Tag)
Ultra-Long DNA Polymerase 是一種專為超長(zhǎng)片段擴(kuò)增設(shè)計(jì)的耐熱DNA聚合酶,具有鏈延伸能力和高保真性,能夠高效擴(kuò)增長(zhǎng)達(dá)數(shù)十千堿基(kb)的DNA片段。這種聚合酶在基因組學(xué)研究中具有重要意義,尤其是在復(fù)雜基因組的完整組裝和超長(zhǎng)測(cè)序領(lǐng)域。特點(diǎn)Ultra-Long DNA Polymerase 的重要優(yōu)勢(shì)在于其超長(zhǎng)擴(kuò)增能力。它能夠在單次反應(yīng)中合成超過100 kb的DNA片段,甚至在某些優(yōu)化條件下,比較大讀長(zhǎng)可達(dá)數(shù)百萬堿基。這種能力使其在填補(bǔ)基因組組裝中的缺口(gap)和實(shí)現(xiàn)端粒到端粒(T2T)基因組組裝方面表現(xiàn)出色。此外,Ultra-Long DNA Polymerase 具有高保真性,能夠降低擴(kuò)增過程中的錯(cuò)誤率,這對(duì)于需要高精度的基因組學(xué)研究至關(guān)重要。它還具備3'-5'外切酶活性,能夠進(jìn)一步提高擴(kuò)增產(chǎn)物的準(zhǔn)確性和可靠性。應(yīng)用Ultra-Long DNA Polymerase 在多個(gè)領(lǐng)域展現(xiàn)出巨大潛力。例如,在植物基因組學(xué)中,它被用于優(yōu)化超長(zhǎng)DNA片段的提取和擴(kuò)增,成功實(shí)現(xiàn)了多個(gè)植物物種的高質(zhì)量T2T基因組組裝。通過結(jié)合牛津納米孔(Oxford Nanopore)測(cè)序技術(shù),Ultra-Long DNA Polymerase 能夠生成超長(zhǎng)讀長(zhǎng)的測(cè)序數(shù)據(jù),明顯提高了基因組組裝的完整性和準(zhǔn)確性。
Uracil-DNA Glycosylase (E. coli) (5U/μl):高效去除尿嘧啶的分子生物學(xué)工具Uracil-DNA Glycosylase(UDG)是一種來源于大腸桿菌的重組酶,能夠高效催化DNA鏈中尿嘧啶(dU)堿基與脫氧核糖骨架之間的N-糖苷鍵水解,釋放游離尿嘧啶。這種酶對(duì)單鏈和雙鏈DNA均有效,但對(duì)RNA或短于6個(gè)堿基的DNA寡核苷酸無活性。產(chǎn)品特點(diǎn)UDG酶的主要特點(diǎn)是能夠在PCR反應(yīng)中有效防止產(chǎn)物污染。通過在PCR反應(yīng)中摻入dUTP替代dTTP,生成含有dU的DNA產(chǎn)物,UDG可以特異性降解這些含dU的DNA,從而避免PCR產(chǎn)物的交叉污染。此外,UDG酶在較寬的pH范圍內(nèi)具有活性,適pH為8.0,且不需要二價(jià)陽離子。應(yīng)用場(chǎng)景UDG酶廣泛應(yīng)用于以下領(lǐng)域:PCR產(chǎn)物防污染:通過降解含dU的PCR產(chǎn)物,防止氣溶膠污染導(dǎo)致的假陽性結(jié)果。單核苷酸多態(tài)性檢測(cè):用于檢測(cè)基因組中的單核苷酸變異。基因編輯與位點(diǎn)特異性突變:用于制備和處理含有dU的DNA模板。蛋白質(zhì)-DNA相互作用研究:通過去除尿嘧啶,研究DNA修復(fù)機(jī)制。在PCR反應(yīng)中,UDG酶的推薦使用濃度為0.01U/μl,通常在反應(yīng)體系中加入適量的UDG Buffer以確保比較好活性。此外,UDG酶在RT-PCR中需謹(jǐn)慎使用,因?yàn)槠淇赡芟潞铣傻腸DNA。
Hot-Start Taq Master Mix (2×)(Without Dye):擴(kuò)增的得力助手在現(xiàn)代分子生物學(xué)研究中,聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)技術(shù)是不可或缺的工具,廣泛應(yīng)用于基因克隆、基因表達(dá)分析、遺傳病診斷、病原體檢測(cè)等諸多領(lǐng)域。而一款PCR反應(yīng)體系則是實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵。Hot-Start Taq Master Mix (2×)(Without Dye)憑借其獨(dú)特的配方和性能,成為了眾多科研工作者的主要。一、熱啟動(dòng)機(jī)制:開啟擴(kuò)增之門Hot-Start技術(shù)是該Master Mix的亮點(diǎn)之一。在常規(guī)PCR反應(yīng)中,由于Taq酶在室溫下就具有活性,容易導(dǎo)致引物非特異性結(jié)合和延伸,從而產(chǎn)生非特異性擴(kuò)增產(chǎn)物,影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和重復(fù)性。而Hot-Start Taq Master Mix通過特殊的化學(xué)修飾或抗體封閉技術(shù),在反應(yīng)初期將Taq酶的活性暫時(shí)抑制,只有當(dāng)反應(yīng)體系升溫至一定溫度時(shí),修飾或抗體才會(huì)被破壞,Taq酶活性得以釋放。這一機(jī)制有效避免了低溫下的非特異性擴(kuò)增,顯著提高了PCR反應(yīng)的特異性和準(zhǔn)確性,尤其適用于復(fù)雜模板、低豐度靶基因以及對(duì)特異性要求極高的實(shí)驗(yàn)場(chǎng)景。通過測(cè)序或基于PCR的方法(如T7E1酶切和測(cè)序)來驗(yàn)證gRNA的編輯效率,篩選出效率高的gRNA序列 。
一、產(chǎn)品特點(diǎn)Taq PCR Master Mix (2×) (With Dye)是一種預(yù)混型的PCR反應(yīng)體系,其濃度為2×,使用時(shí)只需按照1:1的比例與模板和引物混合,即可直接進(jìn)行反應(yīng),極大地簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)操作流程,減少了人為誤差。同時(shí),該產(chǎn)品含有染料,無需在PCR反應(yīng)結(jié)束后添加上樣緩沖液,可直接進(jìn)行電泳分析,進(jìn)一步提高了實(shí)驗(yàn)效率。在成分方面,該產(chǎn)品采用了高質(zhì)量的Taq DNA聚合酶,這種酶具有強(qiáng)大的熱穩(wěn)定性和高效的催化活性,能夠在高溫條件下穩(wěn)定地催化DNA合成反應(yīng)。此外,還添加了優(yōu)化的緩沖體系和dNTPs,確保了反應(yīng)的高效性和特異性。這些成分的協(xié)同作用,使得Taq PCR Master Mix (2×) (With Dye)在各種復(fù)雜的模板和引物條件下,均能表現(xiàn)出優(yōu)異的擴(kuò)增效果。二、性能優(yōu)勢(shì)高靈敏度與特異性:Taq PCR Master Mix (2×) (With Dye)能夠精細(xì)地識(shí)別并擴(kuò)增目標(biāo)基因片段,即使在模板濃度較低的情況下,也能實(shí)現(xiàn)高效的擴(kuò)增。其特異性高,可有效避免非特異性擴(kuò)增產(chǎn)物的產(chǎn)生,確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。無論是基礎(chǔ)研究還是臨床診斷,它都能滿足多樣化的實(shí)驗(yàn)需求,助力科學(xué)研究的順利開展。Recombinant Human Notch 3 Protein,His-Avi Tag
許多Probe qPCR Mix (2×)產(chǎn)品采用熱啟動(dòng)DNA聚合酶,能減少非特異性擴(kuò)增,提高反應(yīng)的靈敏度和特異性 。Recombinant Human FLT3/Flk-2(His-Avi Tag)
Taq DNA聚合酶:分子生物學(xué)的“明星酶”Taq DNA聚合酶是一種從嗜熱菌Thermus aquaticus中分離得到的耐熱性DNA聚合酶,因其獨(dú)特的耐高溫特性和高效的DNA合成能力,成為分子生物學(xué)領(lǐng)域不可或缺的工具。該酶在PCR(聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))技術(shù)中發(fā)揮著重要作用,極大地推動(dòng)了基因擴(kuò)增、測(cè)序和診斷技術(shù)的發(fā)展。Taq DNA聚合酶具有5'→3'聚合酶活性和5'→3'外切酶活性,但缺乏3'→5'外切酶活性,這使得它在DNA合成過程中能夠快速延伸引物,同時(shí)在PCR產(chǎn)物的3'端添加一個(gè)突出的A堿基,便于后續(xù)的克隆操作。此外,Taq酶的耐熱性使其能夠在PCR的高溫變性步驟中保持穩(wěn)定,從而實(shí)現(xiàn)高效的循環(huán)擴(kuò)增。近年來,科學(xué)家們通過對(duì)Taq DNA聚合酶的改造和優(yōu)化,開發(fā)出多種突變體,以滿足不同的實(shí)驗(yàn)需求。例如,Klentaq1突變體具有更高的耐熱性和保真性,適用于長(zhǎng)片段PCR擴(kuò)增。此外,Taq酶的5'外切酶活性還被用于開發(fā)新型的多重PCR檢測(cè)技術(shù),如“MeltArray”技術(shù),實(shí)現(xiàn)了在單次反應(yīng)中檢測(cè)多個(gè)靶點(diǎn)。Taq DNA聚合酶的發(fā)現(xiàn)和應(yīng)用不僅極大地簡(jiǎn)化了DNA擴(kuò)增的流程,還為基因診斷、遺傳病檢測(cè)和個(gè)性化醫(yī)療等領(lǐng)域提供了強(qiáng)大的技術(shù)支持。Recombinant Human FLT3/Flk-2(His-Avi Tag)